[发明专利]用于透气性细胞培养过程的封闭系统装置和方法

说明书

本发明涉及用于透气性细胞培养过程的封闭系统装置和方法。本发明公开了用于细胞培养和细胞回收的新方法和新仪器。所述方法和仪器简化了从培养基分离细胞的过程，最小化了在流体处理期间对透气性装置的潜在损害，并使得能够以封闭系统自动化进行细胞培养以及从透气性装置回收细胞。

本申请是申请号为201480036278.2的中国专利申请的分案申请，原申请是2014年6月24日提交的PCT国际申请PCT/US2014/043914于 2015年12月24日进入中国国家阶段的申请。

相关申请

本申请要求于2013年6月24日提交的名称为“CLOSED SYSTEM DEVICE ANDMETHODS FOR GAS PERMEABLE CELL CULTURE PROCESS”的美国临时专利申请No.61/838,730的权益，所述申请通过引用完全并入本文。另外，共同未决的美国专利申请No.10/961,814(下文中的“814”)、美国专利申请No.11/952,848(下文中的“848”)、美国专利申请No.12/963,597(下文中的“597”)、美国专利申请No.13/475,700 (下文的“700”)和美国专利申请No.13/493768(下文的“768”)通过引用以其整体并入本文。

技术领域

本发明的技术领域涉及静态细胞培养方法和装置，其在新的透气性细胞培养装置内有效地扩增细胞并允许向所述培养系统添加或从其移出流体，具有很小的污染风险或无污染风险，很少的细胞损失或无细胞损失，以及透气性表面很少变形或无变形。

背景技术

T细胞疗法、过继免疫疗法和过继细胞疗法指用于治疗多种疾病的强大方法，其包括体外扩增免疫系统的细胞，并随后将所扩增的细胞输注到患者中以对抗疾病。为了这些形式的疗法达到社会的多个方面，扩增细胞群和收集细胞的过程需要成本有效、实用、不易损失细胞并具有最小的至没有污染的风险。

目前为止，还没有用于制备和储存在不经受污染的T细胞疗法、过继免疫疗法和过继细胞疗法应用中产生之细胞并且也不需要在细胞产生后用显著量的努力使细胞从培养基分离的成本有效且实用的系统。为了 FDA批准，使得T细胞产生过程实用的关键要素是最小化以及甚至消除污染的机会，同时最小化过程复杂性。在本领域的常规词典中，培养过程一般对污染是封闭的，通常称为“封闭系统”。WAVE Bioreactor^TM、OriGen PermaLife^TM袋和/或袋是适于封闭系统T细胞产生的装置。袋具有能够随培养基和细胞移出而皱缩的柔性外壳，通常通过挤压袋子、依靠重力和或通过用蠕动泵吸出培养基来移出。WAVE Bioreactor^TM依靠蠕动泵来移出培养基和细胞。

最近，G-Rex^TM细胞培养装置对于T细胞培养变得流行，其基于相对于WAVEBioreactor^TM、OriGen PermaLife^TM袋和袋的多种优点。优点之一是在共同未决“570”中描述的在收集细胞之前移出绝大多数培养基以使从培养基分离细胞所需要的时间和努力最小化的能力。然而，已经发现依赖于前述方法的移出培养基和细胞的现有技术方法不适用于G-Rex^TM培养装置。G-Rex装置不像袋一样随培养基的移出而皱缩并且使用蠕动泵将培养基从G-Rex装置移出使得平面的透气性表面处于这样的状态，其中所述平面的透气性表面从其水平培养位置移动并通过在装置中形成的真空被拉到装置的内部体积中。尝试防止真空形成，通过使用越来越大表面积的通气滤器(vent filter)未形成能够使得透气性表面保持在平面和/或水平位置的可行构造。将膜拉出其平面和/或水平状态对产生过程是有害的并且可能造成在培养基体积减小时损失细胞或者形成可导致培养物污染和/或将工人暴露于生物危害的泄漏。

因此，为了简化在封闭系统方式中的细胞回收过程(特别是对于T 细胞疗法领域)，需要建立用于透气性细胞培养装置的封闭系统流体处理的新方法，包括“814”、“848”、“597”、“700”和“768”中公开的那些。