[发明专利]一种苏云金杆菌以色列亚种培养基及其应用

说明书

本发明属于微生物培养基技术领域，具体公开了一种苏云金杆菌以色列亚种培养基，各组分的重量百分比分别为：蔗糖0.5～1％、玉米粉0.6～1.2％、豆饼粉1～5％、蛋白胨0.1～0.5％，玉米浆0.4～1.2％，碳酸钙0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.1％、硫酸镁0.05～0.1％、硫酸锌0.05～0.1％、氯化钠0.1～0.3％、硝酸钾0.01～0.05％、去离子水89.95～97.04％。本发明还公开了上述培养基在培养苏云金杆菌以色列亚种中的应用。本发明培养基可促使苏云金杆菌以色列亚种快速进入对数生长期，发酵菌液活芽孢比例大于90％，对埃及伊蚊及淡色库蚊幼虫毒力高，从而大大提高产品质量，降低生产成本，适于大批量规模化培养生产。

技术领域

本发明涉及一种微生物培养基，特别涉及一种苏云金杆菌以色列亚种培养基。

背景技术

苏云金杆菌以色列亚种为革兰氏阳性菌，菌体两端钝圆，具鞭毛，运动活跃，孢子囊不膨胀，芽孢短椭圆形或卵圆形，伴孢晶体近圆形。苏云金杆菌以色列亚种的主要灭蚊活性物质是晶体蛋白，在芽孢形成II期产生，有三种不同类型晶体组成，位于芽孢外膜外，在生长过程中随着芽孢的释放而脱落。晶体蛋白被幼虫取食后在昆虫中肠碱性蛋白酶作用下解离出毒性肽，破坏呼吸链正常功能，造成蚊幼虫死亡。苏云金杆菌以色列亚种对多种蚊幼虫具有较高的毒杀力，是世界范围内广泛应用于蚊虫防治的微生物。其优点在于可控制1～4龄幼虫，施药后见效快(4～24h)，持效长(7～30d)，适用于除饮用水外各种水体(包括浇灌水)的蚊类防治，在水体中可自然分解，无污染，不影响非目标生物，对施药者、野生动物及家畜无副作用。

目前苏云金杆菌以色列亚种的发酵培养基，普遍存在着发酵水平偏低，芽孢形成不一致，产品质量不稳定等缺陷。实际生产中一般多采取调整发酵过程中的温度、压力、通气搅拌等工艺条件来提高有效活菌数量，或对菌种的芽胞采用高温处理，使之在工业发酵过程中能同步形成芽孢，从而提高芽孢形成的数量和比例，来缩短发酵时间，但这些方法实际操作步骤繁琐，而且增加了生产成本。此外，苏云金杆菌以色列亚种对伊蚊幼虫毒杀效果最好，对库蚊幼虫毒杀效果差于球形芽孢杆菌，目前提高其对库蚊毒力的研究多从菌株筛选、转基因工程菌构建等方面实施，增加了研发成本，而且操作困难不宜成功。

发明内容

本发明的目的在于提供一种适合苏云金杆菌以色列亚种生长的培养基及其应用，提高芽孢形成的数量和比例，缩短发酵时间，提高对库蚊幼虫的杀虫效果，增强其应用性。

为达到上述目的，本发明提供了一种苏云金杆菌以色列亚种培养基，其中，各组分的重量百分比分别为：蔗糖0.5～1％、玉米粉0.6～1.2％、豆饼粉1～5％、蛋白胨0.1～0.5％，玉米浆0.4～1.2％，碳酸钙0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.1％、硫酸镁0.05～0.1％、硫酸锌0.05～0.1％、氯化钠0.1～0.3％、硝酸钾0.01～0.05％、去离子水89.95～97.04％。

作为优选的技术方案，所述苏云金杆菌以色列亚种培养基的配方包括以下重量百分比的组分：蔗糖0.5～1％、玉米粉0.8～1％、豆饼粉2～4％、蛋白胨0.1～0.5％，玉米浆0.6％，碳酸钙0.1％、磷酸二氢钾0.05～0.1％、硫酸镁0.05～0.1％、硫酸锌0.05～0.1％、氯化钠0.2％、硝酸钾0.01～0.05％、去离子水92.25～95.54％。

作为优选的技术方案，所述苏云金杆菌以色列亚种培养基的配方包括以下重量百分比的组分：蔗糖0.6％、玉米粉0.8％、豆饼粉3％、蛋白胨0.3％，玉米浆0.6％，碳酸钙0.1％、磷酸二氢钾0.08％、硫酸镁0.1％、硫酸锌0.1％、氯化钠0.2％、硝酸钾0.01％、去离子水94.11％。

作为优选的技术方案，所述苏云金杆菌以色列亚种培养基的配方包括以下重量百分比的组分：蔗糖0.9％、玉米粉0.8％、豆饼粉3％、蛋白胨0.5％，玉米浆0.6％，碳酸钙0.1％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.08％、硫酸锌0.08％、氯化钠0.2％、硝酸钾0.03％、去离子水93.61％。