[发明专利]CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法

权利要求书

1.一种CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法，其特征在于，所述CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法包括以下步骤：

步骤一，通过蛋白表达单元对确定的蛋白进行表达；

步骤二，采用待筛选的化合物对部分蛋白表达单元进行优化；

步骤三，将蛋白表达量与设定的对照系统中的蛋白表达量相比较；

步骤四，对蛋白表达结果进行分析，得出检测(前-)基因毒性活性的相关结论。

2.如权利要求1所述的CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法，其特征在于，所述步骤三中蛋白表达量的测定方法包括：利用SDS-PAGE跑全菌电泳，然后用使用灰度扫描仪对各条带进行灰度扫描，确定目的蛋白占全菌蛋白的百分比；

所述灰度扫描仪使用修正方法对蛋白的图像进行修正，具体包括：

(1)获得最初蛋白扫描图像的灰度数据，设第j行的第i个传感器的最初蛋白扫描图像为Image[j][i]；

(2)根据扫描获得的灰度数据Image[j][i]，计算每个点的修正系数；

1)采样行数为N，传感器个数为M，逐个求第I个传感器的N行图像各对应点的平均值，得到行向量mVector[i]；

2)计算M各传感器行向量的平均值Average：

3)计算第i个传感器的修正系数aVector[i]：

aVector[i]＝Average-mVector[i]；

(3)将修正系数写入灰度扫描仪的EEPROM中；

(4)现将每个像素点的模拟信号转换为数字信号，将与该点对应的修正系数向量按照下式通过加法器相加，得到修正后的像素点的值Rimage[i][j]：

若加法器相加后没有进位，由加法器会直接输出结果Rimage[i][j]；作为修正后的像素点的值；如果加法器相加后有进位，由加法器输出最大值FF，作为修正后的像素点的值。

3.如权利要求1所述的CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法，其特征在于，所述步骤四中的对蛋白表达进行分析包括：

按待分析蛋白要求，选取已知的一维蛋白芯片；取微量的待分析的目标分子置于芯片一侧储液池中，以平均20mm/min的压力驱动或300v/cm的电驱动方式，使样品流经微通道进入小室；经30～10分钟后，用二次水冲洗储液池和微通道中的多余样品溶液；然后以同样条件的压力驱动或电驱动方式将待分析目标分子的一抗兔抗单或多克隆抗体与荧光标记的二抗山羊抗兔IgG；以1∶100比例的抗体稀释液稀释后依次由储液池进入微通道与小室中的微颗粒作用，20分钟后用二次水洗净储液池和微通道，反应后的芯片用荧光成像检测。

4.一种基于权利要求1所述CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法的CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中的分析系统，其特征在于，所述CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中的分析系统包括：

蛋白表达单元，用于对确定的蛋白进行表达；

温育单元，通过采用待筛选的化合物对部分蛋白表达单元进行温育；

比较单元，用于将蛋白表达单元中的蛋白表达与设定的对照系统中的蛋白表达相比较；

分析单元，对蛋白表达进行分析，得出检测(前-)基因毒性活性的相关结论。

5.一种应用权利要求1～3任意一项所述CREB在Ang-2调节VEGFR2表达中分析方法的信息数据处理终端。