[发明专利]一种TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 201910556542.X | 申请日： | 2019-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN110628904A | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 叶婷;刘丹 | 申请（专利权）人： | 武汉菲思特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 31253 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人： | 安曼 |
| 地址： | 430205 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 位点 试剂盒 扩增引物 信号通路 多重PCR 单核苷酸多态性检测 混合反应液 引物特异性 检测试剂 扩增产物 扩增效率 灵活选择 一盒多用 对引物 检测 错配 引物 条目 延伸 | ||
1.一种TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒内包括三对扩增引物和多重PCR混合反应液，其中扩增引物用于扩增TGFB2 rs2799086位点、TGFB2rs17047740位点和TGFBR2 rs304822位点中的至少两个SNP位点，每对引物分别对应一个SNP位点的上下游区域。
2.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：TGFB2 rs2799086位点的上下游扩增引物序列如序列表SEQ ID NO：1～2所示。
3.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：TGFB2 rs17047740位点的上下游扩增引物序列如序列表SEQ ID NO：3～4所示。
4.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：TGFBR2 rs304822位点的上下游扩增引物序列如序列表SEQ ID NO：5～6所示。
5.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：所述多重PCR混合反应液包括DNA聚合酶、Mg2+和dNTPs。
6.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：所述扩增体系中，至少包括TGFB2 rs2799086位点、TGFB2 rs17047740位点和TGFBR2rs304822位点的两个或以上的组合，其中，每个SNP位点的扩增引物和模板的加入量相同。
7.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：所述扩增试剂盒还包括全血样品PCR缓冲液，所述缓冲液含有100mmol/L Tris-HCl，50mmol/LKCl，pH 9.3～9.5。
8.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：扩增体系为50μL的PCR体系，其中包括多重PCR混合反应液25μL。
9.根据权利要求1所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒，其特征在于：用于PCR扩增的DNA模板为提取后的人全血样品。
10.一种采用根据权利要求1～9任一项所述的TGF-β信号通路单核苷酸多态性检测试剂盒的检测方法，其特征在于：所述检测方法对多重PCR扩增产物进行检测。
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