[发明专利]一种丝素载药纳米微囊的制备方法及产品

说明书

本发明公开了一种丝素载药纳米微囊的制备方法以及制备得到的丝素载药纳米微囊，包括：利用丝素蛋白和3‑氨丙基三乙氧基硅烷对功能修饰的聚苯乙烯微球进行交替逐层包覆处理，最终得到多层结构的带有负电势或正电势的包覆聚苯乙烯复合体，最后利用去模板试剂去除功能修饰的聚苯乙烯模板，得到丝素载药纳米微囊；所述功能修饰的聚苯乙烯微为正电势微球，首次包覆采用丝素蛋白，如果是负电势微球，首次处理采用3‑氨丙基三乙氧基硅烷。本发明工艺简单，适用性强，制备的微囊尺寸可控在纳米级，能够更有效的运送药物至细胞内部发挥作用，并且根据药物的性质可对微囊的表面电势进行调控，增强静电吸附，提高有效载药率。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种丝素载药纳米微囊的制备方法及产品。

背景技术

丝素蛋白是一种天然的高分子聚合物，具有良好的生物相容性、高可塑性和优异的机械性能，在骨组织工程和药物载体领域均有广泛的研究和应用。在药物载体领域，丝素蛋白最常用的方式为丝素蛋白微球，其制备工艺多样、制备流程简单，如公开日为2015年9月30日，公开号为CN103341175B的中国专利文献中，公开了一种丝素微球的制备方法。然而，丝素微球作为药物载体具有其局限性，其载药方式单一，大都依靠比表面积进行物理吸附，药物装载量有限，体内运送过程也会造成药物的流失。因此，亟需新的丝素蛋白材料形式作为药物载体，以提高其药物装载率。

丝素中空微球或中空微囊由于其内部中空结构能够提供巨大载药空间，外层结构能对药物实施更有效保护，因而，受到了广泛的关注。目前，制备丝素微囊的方法仍以模板法结合层层自组装技术(Layer-by-Layer)为主，利用有机或无机物作为软/硬模板，通过弱相互作用(如静电引力、氢键、配位键等)，使丝素蛋白逐层交替沉积，经过多次重复形成分子聚集体，最终将模板去除后即可得到丝素蛋白中空微囊。然而，由于丝素蛋白结构的不稳定性，进行自组装时往往需要在每次循环时用有机溶剂对丝素蛋白进行β处理以稳定其结构，一方面增加了操作的复杂性，另一方面也容易造成有机溶剂的残留。丝素蛋白其表面电势呈现微弱的电负性，也常需要对丝素蛋白进行电荷修饰，才能达到良好的静电吸附效果。此外，目前制备的丝素微囊尺寸均在微米级，很难进入细胞进行有效药物传递，体内流通也容易受阻。因此，综上所述，目前还没有一种工艺简单的自助装方法，克服上述技术缺陷，制备纳米级丝素中空微囊，作为药物载体进行药物的有效输送。

发明内容

为了克服现有制备丝素微囊技术中存在的流程复杂、微囊尺寸过大等缺陷，本发明提出了一种制备丝素载药纳米微囊的制备方法，这种方法简单快速、适用性强，而且制备效率高。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

一种丝素载药纳米微囊的制备方法，包括：利用丝素蛋白和3-氨丙基三乙氧基硅烷对功能修饰的聚苯乙烯微球进行交替逐层包覆处理，最终得到多层结构的带有负电势或正电势的包覆聚苯乙烯复合体，最后利用去模板试剂去除功能修饰的聚苯乙烯模板，得到丝素载药纳米微囊；所述功能修饰的聚苯乙烯微为正电势微球，首次包覆采用丝素蛋白，如果是负电势微球，首次处理采用3-氨丙基三乙氧基硅烷。

作为优选，所述功能修饰的聚苯乙烯微球包括表面修饰为氨基化正电势修饰或者羧基化负电势修饰，聚苯乙烯微球的直径为0.05～0.5μm，进一步优选为0.05～2μm。比如可以直接采用市购的氨基聚苯乙烯微球、羧基聚苯乙烯微球产品，市售的氨基聚苯乙烯微球、羧基聚苯乙烯微球一般以水溶液的形式保存，质量百分比浓度一般为2～6％之间。

作为优选，利用丝素蛋白进行包覆处理的步骤为：将待包覆的聚苯乙烯微球置于丝素蛋白水溶液中，分散均匀，然后置于0～10℃继续反应5～50min，包覆完成，其中丝素蛋白水溶液的浓度为1～10mg/mL。