[发明专利]一种动脉粥样硬化诊断用分子标志物及其应用

说明书

本发明公开了一种动脉粥样硬化诊断用分子标志物及其应用，属于生物工程技术领域，检测血管样本中SCRAB1表达水平的试剂在制备诊断动脉粥样硬化产品中的应用，所述SCRAB1的序列如SEQ：ID：NO：1所示。以ApoE基因敲除小鼠和THP‑1源性泡沫细胞为研究对象，提取组织或细胞的RNA，观察AS脂质相关的基因SCRAB1的表达变化，并在在细胞水平验证，建立了由SCRAB1组成的AS脂质沉积特异性诊断方法。该方法简单可靠，取材方便，灵敏度和特异性均与影像学诊断和大体标本染色结果高度吻合，在AS性疾病的早期诊断与预后评估中具有极大的应用价值。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，涉及一种动脉粥样硬化诊断用分子标志物及其应用，具体地说，涉及一种用于诊断同型半胱氨酸(Hcy)相关动脉粥样硬化(AS)脂质代谢标志物及其应用。

背景技术

动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)一种脂质代谢障碍相关的全身性血管病变,是导致临床中急性心肌梗死、脑梗死等血管阻塞性疾病的最主要病理生理基础之一，其防治是当前医学研究领域的重要课题。随着人口老龄化进程的加速,高血压、高血脂、高同型半胱氨酸(Hcy)血症患者逐年增多,AS发病的年轻化的趋势日渐明显，给家庭和社会带来沉重负担。此外，动脉粥样斑块形成是一个复杂的过程,涉及多种机制,包括内皮功能障碍、新血管形成、血管增生、细胞凋亡、基质降解、炎症和血栓形成。不同学者对动脉粥样硬化的发病机制和进展有不同的解释。其中，对于动脉粥样硬化斑块形成机制的认识基础是脂质沉积学说。鉴于AS是一种不可逆性疾病，若能从脂质角度出发，寻找一种与AS斑块早期脂质代谢相关的分子诊断标志物，将有助于提高AS诊断的敏感性和灵敏度，成为未来临床上早期预防Hcy相关AS的重要目标之一。

巨噬细胞参与脂质代谢并形成泡沫细胞，是动脉粥样硬化的发生发展进程中至关重要的环节。正常情况下，细胞内外胆固醇浓度处于动态平衡中。当细胞内胆固醇的过度蓄积、过度酯化、跨膜运动障碍、脂蛋白的(氧化)修饰时，导致泡沫细胞形成。清道夫受体(scavenger receptor，SR)是一种重要的模式识别受体，可结合和内化修饰低密度脂蛋白(lowdesinitlipoprotein,LDL)的细胞表面的糖蛋白。SR广泛分布于内皮细胞、巨噬细胞和血管平滑肌细胞等细胞上。SR可通过识别多聚阴离子：如己酯化的LDL(AcLDL)和氧化LDL(oxLDL)等化学修饰的LDL、多聚核糖核苷酸、硫酸多糖和脂多糖等配体，在多种疾病的发生和发展中起重要的作用。清除剂受体B类1型(SCARB1)是一种细胞表面糖蛋白，与清道夫受体CD36和溶酶体膜蛋白2均属于CD36超家族。有证据表明，SCARB1与HDL的结合呈高亲和性且具有饱和性。作为AS独立危险因子，Hcy所致AS斑块形成中SCARB1具体在脂质代谢的哪些环节发挥重要作用尚未可知，因此寻找AS斑块脂质代谢相关的生物标志物将在AS的早期诊断及预防中具有潜在的价值。

鉴于AS发病率高、复发率高、病残率高、致死率高等特点，寻找AS的生物标志物逐渐成为近年来医学界的研究热点。然而，目前对于动脉粥样斑块脂质代谢相关的生物标志物研究尚少，尤其是差异性表达在动脉斑块中者。因此，基于代谢组学的日渐兴起,寻找一种与动脉斑块脂质代谢相关的生物标志物，探讨有效的早期诊断和干预方法，有助于提出更多、更好的高Hcy血症AS分子诊断策略。

发明内容

本发明的目的在于提供一种动脉粥样硬化诊断用分子标志物及其应用，即一种用于观察高Hcy血症所引起的AS斑块形成中脂质代谢相关的标志物并应用于AS临床早期筛查过程中。该发明中组织标本来自于雄性ApoE基因敲除小鼠，细胞是THP-1单核源性泡沫细胞。

其具体技术方案为：

检测血管样本中SCARB1表达水平的试剂在制备诊断动脉粥样硬化产品中的应用，用于检测人THP-1源性泡沫细胞SCARB1的序列如SEQ：ID：NO：1所示，用于检测小鼠血管样本中SCARB1的序列如SEQ：ID：NO：2所示。