[发明专利]一种胞外囊泡的分离方法在审
| 申请号： | 201910562169.9 | 申请日： | 2019-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN110283776A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 杨蒙;陈福祥 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07;C12N5/04 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 严晨;许亦琳 |
| 地址： | 200011 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 外囊 上清液 制备 生物技术领域 电泳 超滤处理 离心处理 透析处理 杂蛋白 再使用 产率 耗材 回收 污染 | ||
1.一种胞外囊泡的分离方法，包括：
1)将胞外囊泡样品进行离心处理，以提供上清液；
2)将步骤1)所提供的上清液进行电泳透析处理，以提供胞外囊泡液；
3)将步骤2)所提供的胞外囊泡液进行超滤处理。
2.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述胞外囊泡样品选自细胞外液、植物汁液中的一种或多种的组合。
3.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述步骤1)中，离心处理的时间为10～30min，离心处理的转速为10000～15000rpm。
4.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述步骤2)中，电泳透析处理中的截留分子量为250～350kDa和/或电泳透析处理中的孔径为25～30nm。
5.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述步骤2)中，电泳透析处理中的电场环境为200～400mA电泳透析处理中所使用的透析液为Tris-甘氨酸电泳液。
6.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述步骤2)中，将步骤1)所提供的上清液置于透析袋中进行电泳透析处理。
7.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述步骤2)中，电泳透析处理的时间为1～3h，每隔0.2～0.8h更换电泳液。
8.如权利要求1所述的胞外囊泡的分离方法，其特征在于，所述步骤3)中，超滤处理的截留分子量为100～200kDa，超滤处理的转速为3000～4000rpm，超滤处理的时间为5～15min。
9.一种胞外囊泡，由权利要求1～8任一权利要求所述的胞外囊泡的分离方法制备获得。
10.如权利要求9所述的胞外囊泡，其特征在于，所述胞外囊泡粒径为50～200nm，且保持完整的结构。
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