[发明专利]一种糖缀合物及其用途

说明书

本发明提供了一种糖缀合物，和将细菌荚膜多糖的伯羟基氧化为醛基并与载体蛋白赖氨酸的伯氨基反应制备糖缀合物的具体制备方法及一种包含所述糖缀合物的免疫原性组合物。本发明还公开了所述糖缀合物、免疫原性组合物在制备预防和/或治疗个体肺炎链球菌感染、与肺炎链球菌相关的疾病的药物或疫苗中的应用。本发明所述的糖缀合物具有免疫原性更高、杀菌作用更强的特点。

技术领域

本发明涉及疫苗研制技术领域，具体涉及一种肺炎链球菌4型荚膜多糖与载体蛋白反应制备获得的糖缀合物，一种包含所述糖缀合物的免疫原性组合物，以及所述的糖缀合物、免疫原性组合物在制备预防和/或治疗个体肺炎链球菌感染、与肺炎链球菌相关的疾病的药物或疫苗中的应用。

背景技术

肺炎链球菌为革兰氏阳性菌，菌体似矛头状，成双或成短链状排列的双球菌，宽端相对，尖端相背，有较厚的荚膜。肺炎链球菌感染致病在世界范围内是导致发病率和死亡率的主要因素之一。肺炎、发热性菌血症和脑膜炎是侵袭性肺炎链球菌疾病的最常见表现，而细菌在呼吸道内散播可导致中耳感染、鼻窦炎或者复发型支气管炎。

肺炎链球菌细胞壁外的荚膜多糖成分与结构常常与细菌的病原性和血清型有关，目前发现的肺炎链球菌荚膜多糖的变化具有超过90多种不同的血清型，其中，20多种用于制备由肺炎链球菌感染所导致疾病的疫苗。肺炎链球菌缀合物疫苗(PCV)是用于预防肺炎链球菌所致疾病的肺炎球菌疫苗，目前在全球上可以获得十三价疫苗

尽管荚膜多糖自身是免疫原性的，但多糖与载体蛋白的缀合已用于改善免疫原性，使用与蛋白载体连接的多糖制备多糖蛋白缀合物疫苗，多糖与蛋白载体的化学键可诱导针对在其表面上展现疫苗所包含的多糖的细菌的免疫应答，由此预防疾病，因此，使用来自致病细菌的多糖的疫苗接种是增强宿主免疫力的潜在策略。例如：

非专利文献Deciphering Antigenic Determinants of Streptococcuspneumonia Serotype 4 Capsular Polysaccharide using Synthetic Oligosaccharides(ACS Chem.Biol.，2016，11(2)，pp 335–344)公开了丙酮酸基是肺炎链球菌血清型4荚膜多糖的保守抗原位点。同时，专利CN101180079A公开了疫苗的制备方法，包括肺炎链球菌血清型4多糖经过弱酸水解，脱除部分丙酮酸保护基，后经高碘酸钠氧化得到临位醛基，再与蛋白缀合，得到多糖蛋白缀合物。该方法制备的疫苗在免疫应答和功能活性上均取得了很好的效果，但是高碘酸钠氧化糖链的方法必须要求糖链中具有2个相邻的游离羟基基团，同时，荚膜多糖的免疫原性、产率、杀菌作用等依然有提高的空间。

专利CN108524931A公开了活化荚膜多糖并与载体蛋白反应制备糖缀合物，具体的，所述的荚膜多糖为肺炎链球菌(S.pneumoniae)(Pn)-血清型3、10A、12F和33F荚膜多糖，并对该糖缀合物的稳定性、免疫原性程度进行验证。但是该专利只是泛泛的提到了在免疫原性组合物中还可以包括通过肺炎链球菌血清型1、4、5、6A、6B、7F、8、9V、11A、14、15B、18C、19A、19F、22F和23F荚膜多糖制备的糖缀合物，并没有公开肺炎链球菌血清型4荚膜多糖与蛋白载体偶联的糖缀合物，更没有披露血清型4荚膜多糖活化时的氧化位点。

发明内容