[发明专利]一株分泌抗异丙威单克隆抗体的杂交瘤细胞株GTY及其应用在审

专利信息
申请号: 201910565479.6 申请日: 2019-06-27
公开(公告)号: CN110423729A 公开(公告)日: 2019-11-08
发明(设计)人: 胥传来;章晓萍;匡华;徐丽广;马伟;刘丽强;吴晓玲;宋珊珊;胡拥明 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N5/20 分类号: C12N5/20;C07K16/44;C07K14/795;G01N33/577;C12R1/91
代理公司: 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 代理人: 时旭丹;张仕婷
地址: 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 异丙威 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 保藏 弗氏佐剂 分泌 间接竞争酶联免疫法 应用 免疫BALB/c小鼠 小鼠骨髓瘤细胞 中国微生物菌种 免疫检测领域 筛选 检测灵敏度 微生物中心 小鼠脾细胞 次亚克隆 免疫检测 食品安全 完全抗原 残留量 高效价 细胞株 等量 乳化 残留 细胞 检测 融合 水果 管理
【权利要求书】:

1.一株分泌抗异丙威单克隆抗体的杂交瘤细胞株GTY,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2019年3月7日,保藏编号CGMCC No.17393。

2.抗异丙威单克隆抗体,其特征在于:它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.17393的异丙威单克隆抗体杂交瘤细胞株GTY分泌产生。

3.权利要求2所述抗异丙威单克隆抗体的应用,其特征在于:用于食品安全检测中异丙威残留的分析检测。

4.抗异丙威单克隆抗体杂交瘤细胞株GTY免疫用完全抗原的制备方法,其特征是步骤如下:称取1.5mg异丙威衍生物,其中异丙威衍生物与钥孔血蓝蛋白KLH摩尔比为3000:1,2.1mg N-羟基琥珀酰亚胺NHS,溶解于300μL N,N-二甲基甲酰胺DMF中,室温搅拌反应10min;再称取3.4mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC,用100μL DMF充分溶解后,加入到衍生物溶液中,室温搅拌反应6-8h,称为A液;取8mg KLH,用0.01M硼酸盐缓冲溶液BB,pH=8.6稀释至4mg/mL,称为B液;再逐滴将A液缓慢加入到B液中,室温反应过夜;然后用0.01M PBS溶液透析,除去未反应的小分子半抗原,得到完全抗原异丙威-KLH,并通过紫外吸收扫描方法进行鉴定。

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