[发明专利]hnRNPC基因C1和/或C2亚型作为药物靶标在筛选抗癌药物中的应用

说明书

本发明公开了一种hnRNPC基因C1和/或C2亚型作为药物靶标在筛选抗癌药物中的应用。本发明发现hnRNP C两个同源异构亚型C1和C2在癌细胞的生长中发挥影响作用，hnRNP C1抑制癌细胞生长，hnRNP C2促进癌细胞生长，并进一步发现上调hnRNP C1、或抑制hnRNP C2的表达量或使hnRNP C2表达沉默均能抑制癌细胞生长。本发明利用调控hnRNP C的外显子4的可变剪接来减少hnRNP C2的表达，hnRNP C2的剪接位点及附近的对hnRNP C2的剪接起调控作用序列均可作为减少hnRNP C2表达量和治疗癌症的靶点。本发明为研制抗癌药物提供了新的靶点。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及一种hnRNPC基因C1和/或C2 亚型作为药物靶标在筛选抗癌药物中的应用。

背景技术

真核生物，包括人的基因都存在于染色体基因组中。但基因组上的基因序列一般不是连续的，而是包含外显子(exon)和内含子(intron)。当基因从基因组上转录下来为前体mRNA(pre-mRNA)时，必须将内含子去除，并将外显子连接在一起才能形成成熟的mRNA，才能指导蛋白质的合成，这个过程称为RNA的剪接(也可称为剪切)。但前体mRNA中内含子和外显子的剪接并不是不变的，有些外显子和内含子可以有多种剪接方式被称为可变剪切(alternative splicing)。比如：有些外显子可能在剪接时不被包括在成熟的mRNA中，称为外显子跳跃(exon skipping)，有些内含子没有被去除，而被保留在成熟的mRNA中，称为内含子保留(intron retention)。一个基因的前体mRNA可以有多种可变剪接方式，这些可变剪接可以单独或同时发生，从而产生数量众多的同源异构mRNA，编码同源异构蛋白，极大地增强了基因组的编码能力。

近年来，随着DNA测序和分析技术的快速进步以及基因组和转录组研究的不断深入，越来越多的研究发现，癌症的发生发展与前体mRNA可变剪接的调控有密切关系。癌症细胞的前体mRNA可变剪接模式与正常细胞往往有很大区别。异常的前体mRNA剪接方式可能使促癌的同源异构蛋白表达水平升高，或产生一些有致癌作用的异常蛋白，或者使抑癌基因失去功能，从而有利于癌症的发生发展。目前在很多癌症中都发现RNA异常剪接是癌症发生的重要原因。比如Fas是一种凋亡相关蛋白,可启动凋亡信号的转导而引起细胞凋亡。Fas的前体mRNA经可变剪接产生两种同源异构mRNA，包含外显子5至7的亚型，具有促进凋亡的作用。而不包含外显子 6的亚型则具有相反功能，可以抑制凋亡的作用，有利于肿瘤细胞生存。如果能够促进外显子6的剪接，则有可能促进癌细胞的凋亡，从而达到抑制肿瘤的目的。但由于基因组有数量非常大的前体mRNA的可变剪接，很多基因可能都参与了癌变过程，对于前体mRNA可变剪接在癌症发生发展中的作用目前还有很多问题亟待解决。

细胞中前体mRNA可变剪切的调节主要由可变剪切因子(splicing factor)进行。核内不均一核糖核蛋白C(下称hnRNP C)是一个重要的前体mRNA剪接调控因子，属于核内不均一核糖核蛋白(heterogenous nuclear ribonucleoproteins,hnRNPs)家族。该家族是一组核内RNA结合蛋白，在细胞周期、细胞生长和凋亡相关等基因的表达和前体mRNA的可变剪切中发挥重要作用。目前共发现20多种hnRNP蛋白，其中hnRNP C是主要的成员。HnRNP C有两个同源异构亚型，即C1和C2。这两种亚型是由hnRNP C的外显子4经可变剪接产生。与C1相比，C2多了一段13个氨基酸的特异性序列。有报道认为hnRNP C可以促进miR-21的表达，并进而抑制 miR-21的靶基因PCDC4的表达，有利于癌细胞的转移。但hnRNP C，特别是其亚型C1和C2与癌症的关系和在致癌过程中的作用还很不清楚。

发明内容

为了解决上述问题，本发明经过大量实验、潜心研究，发现了hnRNPC 基因C1和C2亚型与癌症的关系和在致癌过程中的作用。