[发明专利]黄姑鱼的人工催产受精方法

说明书

本发明提供黄姑鱼的人工催产受精方法，属于生物技术领域，包括在黄姑鱼亲本培育期间，向黄姑鱼亲本投喂本发明中制得的具有稳定性的组合物，并进行营养强化，待亲本性成熟后，进行人工采卵采精完成授精，获得受精卵，将受精卵进行孵化，并对鱼苗进行培育，上述人工采卵采精前，不向黄姑鱼亲本注射催产激素。本发明的人工催产受精方法能调节卵子、精子最后同步成熟以避免产卵排精不同步不顺畅现象，避免产后亲鱼死亡损失，雌鱼排卵量大，雄鱼精液质量高，能提升孵化率和有效孵化量以增加鱼苗产出量；组合物稳定性好易保存，能增加精巢和卵巢内脂肪、蛋白质和总糖积累量，使得亲本卵巢和精巢发育同步成熟，增加亲本雌鱼的排卵量。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及黄姑鱼的人工催产受精方法。

背景技术

黄姑鱼(Nibea albiflora)，俗称黄婆鸡，属鲈形目，石首鱼科，黄姑鱼属，体形与黄花鱼有相似处，为近海中下水层鱼类，主要栖息于砂泥底质的沿岸海域，以小型甲壳类及小鱼等底栖动物为食，为我国东南沿海重要的增殖和养殖品种，其肉质鲜美，营养丰富，具有较高的营养和药用价值，市场需求量在不断上升。值得一提的是，黄姑鱼具有一种大黄鱼所没有的抗虫肽基因，对刺激隐核虫具有特殊的免疫力，可做为白点病疫情高发区首选替代养殖品种。

由于近些年受到环境恶化、过度捕捞等原因，黄姑鱼野生资源日渐衰减，导致市场上黄姑鱼供不应求，价格大幅度上升，发展黄姑鱼人工养殖业的重要性日益凸显，这样可以减少自然灾害给黄姑鱼养殖带来的不利影响，增加黄姑鱼的养殖产量，促进黄姑鱼工厂化养殖产业的发展。目前黄姑鱼的人工繁殖大多依靠亲本自然成熟来实现产卵，由于黄姑鱼亲本成熟度存在差异，雌雄鱼性腺发育不同步，雄鱼性腺成熟早于雌鱼，而且雌鱼性腺发育一般都存在明显的个体差异，容易造成产卵的不同步性，无法实现对产卵时间及产卵量的人为控制，既不利于生产，也无法满足鱼类遗传育种定向交配的要求。人工催产并人工授精在一定程度上解决了黄姑鱼等鱼类亲本群体性腺成熟度差异造成的排卵不集中、排卵周期较长的问题，通过人工催产，可以促使亲鱼一次性产卵，产卵多，出苗整齐。对黄姑鱼规模化人工育苗技术进行优化并应用到生产实践，旨在突破规模化人工育苗和养殖效率低下的瓶颈，以期促进黄姑鱼人工养殖业的发展。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能改进组合物稳定性，使得组合物在室温下能保存，能保护催产素不被氧化变质，使得催产素阈值窗时间被延长，所含包覆微球包封产率高，能减小微球粒径以避免大粒径聚集效应的用于制备具有稳定性的组合物的方法，所制组合物能增加精巢和卵巢内脂肪、蛋白质和总糖积累量，使得亲本卵巢和精巢发育同步成熟，增加亲本雌鱼的排卵量。

本发明的目的还在于提供一种能调节卵子、精子最后同步成熟以避免个体间产卵排精不同步不顺畅现象，能避免产后亲鱼死亡损失，能使得亲本雌鱼排卵量大，雄鱼精液质量高，能提升孵化率和有效孵化量以增加鱼苗产出量的黄姑鱼的人工催产受精方法。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

用于制备具有稳定性的组合物的方法，包括，a，制备缓冲溶液并调节其pH；b，向缓冲溶液中添加具有催产功能的催产素；并且此后，c，向步骤b所得分散体质中添加至少一种非离子型纤维素醚；上述缓冲溶液为碱性；上述催产素中包括N-乙酰基-L-半胱氨酸包覆微球。该方法制得的组合物中生物物质的稳定性被改进，尤其是所呈现的组合物的生物活性和治疗效果通过避免过多的降解或聚合、或催产素物质的其他结构变化而被改进，使得催产素的生物活性或治疗活性被提升和延长，对于使用者还是更易操作的，归因于改进后的生物活性，该组合物不需要总被储存在冷环境(-15～-5℃)下而可以更便利的被保存在室温中，且在使用或储存期间，仍保持组合物的生物活性。