[发明专利]一种从润楠叶中提取润楠多糖的方法

说明书

本发明申请属于多糖提取技术领域，具体公开了一种从润楠叶中提取润楠多糖的方法，(1)原料准备；(2)粉碎；(3)脱脂；(4)脱单糖；(5)提取复合溶液；(6)离心；(7)除蛋白；(8)醇析过夜；(9)沉淀处理。本发明主要用于提取润楠多糖，解决了现有技术中提取多糖方法复杂导致应用范围较小的问题。

技术领域

本发明属于多糖提取技术领域，具体公开了一种从润楠叶中提取润楠多糖的方法。

背景技术

润楠是樟科，润楠属乔木。根据医术记载其茎、叶、皮药用，治霍乱、吐泻不止，抽筋及足肿。其中宜昌润楠在我国传统和民间医药典籍中有应用记载，在三峡区域民间主要应用 其治疗各种皮肤炎症、关节肿痛和风湿性疾病，疗效显著，且无明显的毒副作用。研究人员 对已分离鉴定的化学成分和主要提取部位进行了初步的活性评价和筛选，主要研究结果有： 通过溶剂提取法和多种色谱方法对宜昌润楠干燥茎枝的95％乙醇提取物进行分离纯化，利用 现代波谱技术和理化性质进行结构鉴定：一共分离鉴定了52个化合物，分别是润楠香豆素 (1)、润楠丁内脂A(2)、润楠丁内酯B(3)、润楠丁内酯C(4)、润楠丁内酯D(5)、润楠丁内 酯E(6)、润楠丁内酯F(7)等

多糖又称多聚糖，是由单糖缩合成的多聚物，广泛分布于自然界中，是一类由醛糖或酮 糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，包括同多糖和杂多糖，多由10个以上单糖构 成的糖单位重复组成，它是生物体内重要的生物大分子，是维持生命活动正常运转的基本物 质之一。近年来随着中药材多糖研究的深入，其多种药物功效被证实，如保肝、抗肿瘤、抗 氧化、抗炎、抗凝血、降血糖、免疫调节、保湿等。

当前对其他植物多糖提取方法主要有：采用水提醇沉法、酶解—水提醇沉法、超声波— 水提醇沉法、微波—水提醇沉法。这些方法成本高，能耗高、过程相对复杂，导致提取方法 应用范围较小。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从润楠叶中提取润楠多糖的方法，以解决现有技术中提取多 糖方法复杂导致应用范围较小的问题。

为了达到上述目的，本发明的技术方案为：一种从润楠叶中提取润楠多糖的方法，包括 以下步骤：

(1)原料准备：树龄5年以上的新鲜成熟润楠叶片，叶片大小均匀，无病虫害，洗净后60℃干燥至恒重；

(2)粉碎：将步骤(1)中干燥至恒重的润楠叶片放入粉碎机中粉碎，粉碎后过60目筛；

(3)脱脂：将步骤(2)中粉碎后的润楠粉末加入适量石油醚，80℃下索氏提取法回流 1.5h，过滤得药渣，将药渣自然风干；

(4)脱单糖：将步骤(3)中脱脂后的润楠药渣加入适量质量分数为95％乙醇，85℃下 回流1.5h，过滤得药渣，将药渣自然风干备用；

(5)经(1)～(4)处理过的润楠粉末控制料液比为1:200，加入适量复合酶，调节pH值为4，提取2h得到复合溶液；

(6)离心：将步骤(5)中的复合溶液离心，滤液在70℃下旋转蒸发浓缩；

(7)除蛋白：将步骤(6)中蒸发浓缩的滤液用TCA法去蛋白，100％TCA按照1:10的比例加入到上述滤液中，4℃沉淀1h，离心去除沉淀，保留上清液；

(8)醇析过夜：将步骤(7)中离心后收集上清液加入95％乙醇，上清液与乙醇的体积 比为1:3，静置于4℃环境中醇沉过夜；

(9)沉淀处理：离心，沉淀用80％乙醇洗涤三次。真空干燥得润楠多糖。

进一步，步骤(5)中使用的符合酶为果胶酶、木瓜蛋白酶、纤维素酶酶，浓度分别为50U/g、50U/g、100U/g。使用上述种类的酶能加快酶解速度，提高了提取润楠多糖的提取效率。