[发明专利]一种可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694及其用途

说明书

本发明公开了一种可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶及其用途。所述脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶的基因序列如SEQ ID NO:1所示。具有脱除琼脂硫酸基团的用途。

技术领域

本发明涉及基因领域，尤其涉及一种可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694及其用途。

背景技术

琼脂(Agar)又称琼胶，俗称洋菜、冻粉或冻胶，就是由红海藻纲中提取的亲水性胶体，在食品、医药工业、轻工、生物工程等许多方面有广泛的应用。红藻中的天然琼脂分子上带有大量的硫酸基团，是影响琼脂形成凝胶的关键因素。而凝胶强度又是衡量琼脂产品品质的主要指标，所以在琼脂的生产过程中去除硫酸基团，提高琼脂的凝胶强度是非常必要和关键的环节。当前工业生产中普遍使用碱处理来去除海藻粗琼脂中高含量的硫酸基团，碱处理过程后要消耗大量水将海藻洗至中性，不仅会导致环境的污染，而且会造成水资源的严重消耗，同时也会使得琼脂流失。与碱处理技术相比，采用生物酶处理去除粗琼脂中的硫酸基团，不但反应条件比较温和，而且经济环保，无疑为新型琼脂的生产奠定了坚实的基础。

硫酸酯酶(Sulfatases，EC3.1.6.1)是一类可以水解硫酸酯键产生无机硫酸根和相应醇的酶类，它分为烷基硫酸酯酶和芳香基硫酸酯酶。芳香基硫酸酯酶广泛分布于从细菌到哺乳动物的各种生物中，可用于脱除琼脂上的硫酸基团。2012年，Jung KT等人(JungKT,Kim HW,You DJ,Nam SW,Kim BW,Jeon SJ.Identification of the first archaealarylsulfatase from Pyrococcus furiosus and its application to desulfatationof agar.Biotechnology and Bioprocess Engineering.2012,17(6):1140-1146)首次从古菌中发现了芳香基硫酸酯酶，并对其在去除琼脂上的SO42-方面的功能进行了验证。2018年Yanbing Zhu等人(Improvement thermostability of Pseudoalteromonascarrageenovora arylsulfatase by rational design.International Journal ofBiological Macromolecules,2018,108.)也有提到使用芳香基硫酸酯酶去除琼脂上的硫酸基团。这些结果表明芳香基硫酸酯酶在提高琼脂质量方面具有很大应用潜力。但是，目前大多数产芳香基硫酸酯酶的菌株的活性较低，酶稳定性较差，阻碍了此方向的发展和进步。因此，开发活性高、稳定性好的芳香基硫酸酯酶成为了本技术领域的当务之急。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694，其特征在于，所述硫酸酯酶的基因序列如SEQ ID NO:1所示。

进一步，所述硫酸酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

本发明还提供一种含有所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694的重组载体，其特征在于，含有所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶的基因序列；优选的，所述重载载体为含有所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶与pET-28a进行重组得到的重组载体。

本发明还提供一种含有所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694的重组细胞，其特征在于，含有所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶的基因序列；优选的，所述重载细胞为含有所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶与载体重组得到的重组载体再转化得到的重组细胞。

本发明还保护一种用于扩增所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694的引物对，其特征在于，所述引物对的序列如SEQ ID NO:3和4所示。

本发明还保护所述可用于脱除琼脂硫酸基团的硫酸酯酶Sulf1694具有脱除琼脂硫酸基团的用途。