[发明专利]一种交联透明质酸钠凝胶的制备方法

说明书

本发明公开了一种交联透明质酸钠凝胶的制备方法，包括透明质酸的碱性水溶液制备：配制浓度为10‑30％g/ml的透明质酸钠碱液，交联反应：交联反应所采用的交联剂为二乙烯基砜或1,4‑丁二醇二缩水甘油醚，交联反应在透明质酸的碱性水溶液中进行，交联反应的反应温度为20‑40℃，交联反应的时间为4～8h等步骤，本发明的方法具有原料易得，反应条件温和，交联效率高，工艺和后处理简单，易操作的优点。通过交联反应，得到交联透明质酸钠具有三维网络结构，具有较好的机械性能及力学性能，可作为较好的药物载体及组织工程支架材料。

技术领域

本发明属高分子材料技术领域，具体涉及一种交联透明质酸钠凝胶的制备方法。

背景技术

透明质酸(Hyaluronic acid，HA)，又名玻尿酸，是粘多糖中最具代表性的一种，广泛分布于人体各部位，以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能，如润滑关节、调节血管壁的通透性，调节蛋白质，水电解质扩散及运转，促进伤口愈合。透明质酸最早是从牛眼玻璃体中首次分离出的，它广泛存在于人体结缔组织的细胞外基质中，由D-葡萄糖醛酸与N-乙酰葡糖胺通过β1-3键及β1-4键交替组成双糖单位，再由双糖单位重复组成的线性多糖。透明质酸没有种属和组织特异性，具有良好的组织相容性，机体很少对其产生免疫反应。透明质酸具有高度亲水性，这种理化性质使透明质酸即使在很低的浓度下，依然保持凝胶状，透明质酸吸水后体积增大，向周围产生膨胀压力使其可以支撑周围组织。然而天然透明质酸在组织中的半衰期仅为1～2天，会被透明质酸酶或氧自由基在肝脏中分解为CO₂和H₂O。

为了延长透明质酸在体内的停留时间，通常通过改性或交联的方法提高其机械强度和降低其降解速率，目前，常用交联剂为二乙烯基砜，1,4-丁二醇二缩水甘油醚，只能通过交联程度调节其降解时间，因此，在临床上尤其是作为降解可控的组织工程支架材料，实现起来较困难。

交联透明质酸钠是交联透明质酸钠上糖环活性基团与交联剂在一定条件下反应，交联形成的凝胶大分子，也称为交联玻璃酸钠凝胶，是交联HA衍生物的一种。交联反应是大分子包含空间多位点的复杂反应。交联透明质酸钠的理化性质与交联度的大小密切相关。目前制备出的交联透明质酸颗粒粒径分布均匀，具有较高的水溶胀比，但颗粒大多分布在纳米级，适合用于改善皮肤组织吸收能力，不适用于介入栓塞治疗；且在水相中初步交联反应时交联剂未能均匀的分散于透明质酸分子间，存在整体交联程度不均一的问题。综上，目前交联透明质酸钠凝胶仍然缺乏更有效的交联手段以实现作为组织工程支架材料的目的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种交联透明质酸钠凝胶的制备方法，为此，本发明采用了以下技术方案：

本发明公开了一种交联透明质酸钠凝胶的制备方法，它包括以下制备步骤:

1)、透明质酸的碱性水溶液制备：配制浓度为10-30％g/ml的透明质酸钠碱液；

2)、交联反应：交联反应所采用的交联剂为二乙烯基砜或1,4-丁二醇二缩水甘油醚，交联反应在透明质酸的碱性水溶液中进行，交联反应的反应温度为20-40℃，交联反应的时间为4～8h；

3)、冷冻干燥：交联反应结束后，透析，冷冻干燥，得到交联透明质酸钠凝胶干胶，透析磷酸盐缓冲液优选磷酸盐浓度为0.1-0.2M，pH为7.0-7.4；

4)、二次反应：将上述干燥后的凝胶干胶放入到一定量的配好的质量分数为1-5％的过硫酸铵或者过硫酸钾水溶液中，充分浸泡溶胀后，升温到50-70℃并维持反应2-6h；

5)、凝胶制备：反应结束后，以大量含水乙醇浸泡洗涤，最后以pH＝7.4的磷酸盐缓冲溶液浸泡溶胀，即得一种交联透明质酸钠凝胶。

作为进一步地改进，本发明所述的透明质酸与交联剂的质量比为5-20:1。