[发明专利]一种用于软骨损伤修复的功能化壳聚糖多孔微球及其制备方法

权利要求书

1.一种用于软骨损伤修复的功能化壳聚糖多孔微球的制备方法，步骤包括：

S1、将壳聚糖加入质量分数为1～3％的乙酸溶液中，搅拌加热溶解，待溶液澄清后冷却消泡，得壳聚糖乙酸溶液作为乳化用的水相，所述壳聚糖的分子量为110～150kDa，脱乙酰度在80％以上；

S2、选择不溶于水的有机溶剂作为油相，将步骤S1所得壳聚糖乙酸溶液滴加至预乳化的油相中，搅拌形成W/O乳液；

S3、将步骤S2所得W/O乳液滴加至预冷却的步骤S2所述油相中，于-15～-25℃低温静置后移除油相，加入无水乙醇后于-15～-25℃低温静置，移除无水乙醇后加入碱液于-15～-25℃低温静置，移除碱液后洗涤至中性；

S4、向步骤S3所得中性溶液中加入戊二醛进行化学交联反应，反应结束后去除戊二醛得到微球溶液，向微球溶液中加入甘氨酸溶液，去离子水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖多孔微球；

S5、将步骤S4所得壳聚糖多孔微球加入到活化后的10～50mg/mL的KGN溶液中，震荡12～24h，用截留分子量为3.5～20kDa的透析膜透析24～72h，最后冷冻干燥即得功能化壳聚糖多孔微球。

2.如权利要求1所述的用于软骨损伤修复的功能化壳聚糖多孔微球的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述加热溶解温度为35～80℃，形成的壳聚糖乙酸溶液中壳聚糖的质量百分数为1～4％。

3.如权利要求1所述的用于软骨损伤修复的功能化壳聚糖多孔微球的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述壳聚糖乙酸溶液与油相的体积比为1：(4～8)；所述油相为石油醚、正辛烷或正庚烷中的一种或几种。

4.如权利要求3所述的用于软骨损伤修复的功能化壳聚糖多孔微球的制备方法，其特征在于：步骤S2中，向所述油相中添加乳化剂进行预乳化，所述乳化剂的添加量为油相质量的2～6％；所述乳化剂为Span类表面活性剂，或者Span类表面活性剂与Tween类表面活性剂组成的混合物。

5.如权利要求1所述的用于软骨损伤修复的功能化壳聚糖多孔微球的制备方法，其特征在于：步骤S4所述戊二醛的添加量为所述中性溶液质量的5～15％，化学交联反应时长2～12h；甘氨酸溶液中甘氨酸的质量分数为1～6％。