[发明专利]一种miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型的构建方法

说明书

本发明公开了一种miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型的构建方法。首先将miR155基因在小鼠体内过表达，然后用4NQO溶液饲养小鼠10周以上，即可得到所述舌鳞状细胞癌模型。与现有的TSCC动物模型相比，该模型表征稳定，可以在很短的时间内成功诱发小鼠癌前病变，真实模拟舌鳞状细胞癌肿瘤发生、发展的动态变化过程，可为舌鳞状细胞癌的发生、发展分子机制研究，以及筛选诊治分子靶点和探索新的治疗方法的理想模型。另外，该模型的构建方法简单易行、成瘤潜伏期短、建模准确度高、重复性好，且建模成功率高达95.0％以上，在筛选治疗舌鳞状细胞癌的药物中具有很好的推广应用价值。

技术领域

本发明属于动物模型构建技术领域。更具体地，涉及一种miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型的构建方法。

背景技术

舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌，tongue squamous cell carcinoma，TSCC)是最常见的口腔恶性肿瘤，占口腔恶性肿瘤的90％。虽然癌症治疗已取得许多重要进展，但20世纪60年代至今，TSCC的死亡率基本保持不变，中期5年生存率50％左右，晚期5年生存率不超过20％。在所有减少TSCC死亡率和残障率的措施中，早期诊断和预防是最好的方法。TSCC病因学表明：单一因素难以引发TSCC，遗传基因、化学因素、物理因素、生物致癌因素等多因素联合作用致TSCC的发生。目前，TSCC病因和发病机制尚未阐述明确，这给TSCC一级病因预防带来极大困难。因此，口腔癌动物模型尤其是TSCC动物模型的研究备受关注。

传统的TSCC动物模型以化学诱导为主，如：利用1％的二甲基苯并蒽每周三次涂抹大鼠舌部，并联合创伤因素，可使得大鼠16周诱发TSCC，成癌率为 41.2％。Guolan Lu等分别利用0.002％或100μg/mL的4-硝基喹啉-1-氧化物 (4NQO)饮水喂养小鼠，可使得小鼠16～40周诱发TSCC，40周时的成癌率为45.5％～96.5％。但是，以上化学诱导的方法诱导时间长、造模效率较低、个体差异较大，与人TSCC病因和发病机制尚有差距。

因此，建立一种简单易行、建模准确度高、生物学性能稳定、体内可形成 TSCC的更为理想的动物模型，来模拟人的TSCC的发生和生物学特性，是进行 TSCC基础、诊断和治疗临床前研究的必备条件，为继续探索TSCC病因、发病机制和潜在治疗靶点提供理论基础，对TSCC的治疗具有重要的科学指导意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有TSCC动物模型的缺陷和不足，提供一种模型表征稳定、可真实模拟舌鳞状细胞癌肿瘤生长动态变化过程的TSCC动物模型的构建方法，并且该方法简单易行、成瘤潜伏期短、成瘤率高、建模准确度高。

本发明的目的是提供一种miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型的构建方法。

本发明又一目的是提供上述miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型在筛选治疗舌鳞状细胞癌的药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明首先提供了一种miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型的构建方法，将miR155基因在小鼠体内过表达后，用4NQO溶液饲养小鼠10周以上，得到所述舌鳞状细胞癌模型。

优选地，用4NQO溶液饲养小鼠10～20周。

更优选地，用4NQO溶液饲养小鼠15～20周。

当饲养小鼠15周时，miR155过表达小鼠舌鳞状细胞癌模型的构建成功率为 80％；当饲养小鼠20周时，其构建成功率为95.0％以上。

更进一步优选地，用4NQO溶液饲养小鼠20周。

优选地，所述4NQO溶液的浓度为50～100μg/mL。

更优选地，所述4NQO溶液的浓度为50μg/mL。