[发明专利]一种基于偶氮染料脱色活性的产电微生物快速筛选方法有效
申请号: | 201910577470.7 | 申请日: | 2019-06-28 |
公开(公告)号: | CN110376264B | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
发明(设计)人: | 许玫英;宋建华;杨永刚 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) |
主分类号: | G01N27/403 | 分类号: | G01N27/403;C12N1/02;C12N1/00 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星;朱聪聪 |
地址: | 510070 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 偶氮染料 脱色 活性 微生物 快速 筛选 方法 | ||
1.一种基于偶氮染料脱色活性的产电微生物快速筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、将采集获得的环境样品进行预处理,去除样品中较大的杂质颗粒,并对环境样品进行梯度稀释;
b、将不同稀释度环境样品接入含有偶氮染料的孔板培养体系中,经密封后,放入厌氧工作站中培养;
c、选择高稀释度样品中具有偶氮染料脱色能力的样品于血清瓶中扩大培养;
d、将血清瓶中的菌液进行稀释并涂布于偶氮染料固体培养基上;
e、选取偶氮染料固体培养基上能使偶氮染料脱色的单菌落,纯化得到纯菌;
f、将得到的纯菌接入到微生物燃料电池的阳极室,测试其产电能力,筛选出产电微生物;
所述的含有偶氮染料的孔板培养体系和血清瓶中的培养基为偶氮染料培养基,其配方为:十二水合磷酸氢二钠:17.1g/L、三水合磷酸氢二钾:3.93g/L、氯化钠:0.5g/L、氯化铵:1g/L、酵母提取物:0.5—1.0g/L、乙酸钠:0.83—1.66g/L和、苋菜红:0.06—0.10g/L或甲基橙:0.10—0.15g/L,溶剂为水;
所述的微生物燃料电池为双室微生物燃料电池,其阳极室的培养基的配方为:十二水合磷酸氢二钠:17.1g/L、三水合磷酸氢二钾:3.93g/L、氯化钠:0.5g/L、氯化铵:1g/L、酵母提取物:0.5—1.0g/L、乙酸钠:0.83—1.66g/L,溶剂为水;其阴极室的培养基的配方为:铁氰化钾:13.17—16.46g/L,溶剂为水。
2.根据权利要求1所述的基于偶氮染料脱色活性的产电微生物快速筛选方法,其特征在于,所述的孔板培养体系中的孔板是96孔板。
3.根据权利要求1所述的基于偶氮染料脱色活性的产电微生物快速筛选方法,其特征在于,所述的偶氮染料固体培养基是在偶氮染料培养基的基础上加有常量的琼脂。
4.根据权利要求1或2所述的基于偶氮染料脱色活性的产电微生物快速筛选方法,其特征在于,所述的放入厌氧工作站中培养,厌氧工作站的温度保持在30—37℃。
5.根据权利要求1或2所述的基于偶氮染料脱色活性的产电微生物快速筛选方法,其特征在于,所述的双室微生物燃料电池,阴阳两极的电极材料均为石墨板,阴阳两极通过钛丝相连接,中间串联电阻,通过连接数据采集器和电脑来检测电流的产生。
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