[发明专利]液相色谱-电化学检测法测定饮料中爱德万甜含量的方法

说明书

本方案公开了食品分析技术领域液相色谱‑电化学检测法测定饮料中爱德万甜含量的方法，本方法的流动相为乙腈‑50mmol/L乙酸铵，乙腈和乙酸铵的体积比为20:80‑35:65，等度洗脱，色谱柱温度为40℃；电化学检测器配置的检测池为安培检测池或库伦检测池；采用安培检测时，检测电压500～600mV；采用库伦检测时，ECD‑1的电压设置为0～200mV；ECD‑2的电压设置为500～600mV；饮料样品离心处理后上清过滤后进样，对于含蛋白质较高的乳制品加10％三氯乙酸反应后离心，也取上清过滤后进样。该方法操作简单，不需要固相萃取等复杂的前处理，且不需要串联质谱等昂贵的仪器设备，极大降低了检测的成本。

技术领域

本发明涉及食品分析技术领域，具体涉及液相色谱-电化学检测法测定饮料中爱德万甜含量的方法。

背景技术

爱德万甜是日本Ajinomoto公司生产的一种非热量甜味剂。美国、中国等国家食品药品监督管理局已批准将爱德万甜作为食品添加剂广泛用于食品和饮料。它的甜度是糖的2万倍，爱德万甜为一种新的甜味剂，其甜度远超目前常用的甜味剂如阿斯巴甜、甜蜜素、安赛蜜、三氯蔗糖等。爱德万甜(Advantame)，分子式为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-a-天冬氨酰}-L-苯丙氨酸-1-甲酯)(C24H30N2O7·H2O)，分子量为476.52。Advantame水溶性好、耐热温度高，适于高温加工产品。

由于爱德万甜的甜度远超其他甜味剂，因此其在食品中的用量也相对较少。食品中添加微量的爱的万甜即有明显的甜味。因此，对于爱德万甜的检测需要灵敏的检测方法。目前对于爱德万甜的检测有液相色谱法和液相色谱-串联质谱法。其中液相色谱法操作简单，成本低廉，然而常用的紫外检测器灵敏度较低，对于食品中添加的微量爱德万甜难以检出。因此，通常需要采用固相萃取法富集后进样，这极大增加了检测的成本。

相对于液相色谱法，液相色谱-串联质谱法灵敏度更高，可以检测极低浓度的爱德万甜。采用液相色谱串联三重四级杆质谱，在MRM模式下具有较高的灵敏度。然而该方法仪器设备昂贵，对于操作人员的要求较高，为了防止系统污染对于前处理的要求也较高。对于多数食品企业而言，采用串联质谱法进行质量控制难以实现。因此，液相色谱-串联质谱法检测爱德万甜适用于检验检测机构，在食品相关企业的应用存在困难。

发明内容

本发明意在提供一种液相色谱-电化学检测法测定饮料中爱德万甜含量的方法，以解决由于爱德万甜在食品中的添加量较低，现有的检测方法检测其含量比较困难，需要富集才能检测的问题。

本方案中的液相色谱-电化学检测法测定饮料中爱德万甜含量的方法，包括以下步骤：

步骤一、样品处理：精确移取一定量饮料样品，加水稀释，在离心机中离心，上清过滤后进样；对于含蛋白质较高的乳制品，精确移取一定量饮料样品，加10％三氯乙酸反应后，在离心机中离心，取上清液备用；

步骤二、上清液进行液相分离，液相分离色谱条件为：

(1)流动相：乙腈-50mmol/L乙酸铵，乙腈和乙酸铵的体积比为20:80-35:65，等度洗脱；

(2)色谱柱：C18色谱柱，色谱柱规格为2.1*100mm，填料粒径小于2.5μm；

(3)洗脱方法：色谱柱温度为25～40℃，流速0.2～0.5mL/min；

步骤三：液相分离后，采用电化学检测器进行测定，电化学检测条件：电化学检测器配置的检测池为安培检测池或库伦检测池；采用安培检测时，检测电压500～600mV；采用库伦检测时，ECD-1的电压设置为0～200mV；ECD-2的电压设置为500～600mV。