[发明专利]一种利用三唑酮筛选螺旋形螺旋藻藻丝的方法

说明书

本发明涉及螺旋藻生产技术，旨在提供一种利用三唑酮筛选螺旋形螺旋藻藻丝的方法。该方法包括：取适量兼具螺旋形和直线形两种藻丝的螺旋藻藻液，用Zarrouk培养液将其浊度T稀释至0.2；将稀释后的藻液等量分装为多份，分别加入与藻液等体积、含梯度浓度三唑酮的Zarrouk培养液，将藻液的浊度T稀释至0.1；静置培养60d后，选择呈蓝绿色的藻液，取其中三唑酮浓度最高的一组，其该组藻液中的藻丝全部是螺旋形藻丝。本发明基于不同形态藻丝对三唑酮抗性差异筛选螺旋形藻丝，与传统的藻丝单体分离培养法相比，不仅简便、高效，而且成本低，并可实现批量、自动化、高通量筛选。

技术领域

本发明属于螺旋藻生产技术，特别涉及一种利用三唑酮筛选螺旋形螺旋藻藻丝的方法。

背景技术

螺旋藻(Spirulina)为蓝藻门、颤藻目、颤藻科的一个属，至少有38个种，其中的钝顶节旋藻(A.platensis)和极大节旋藻(A.maxima)等少数种，因具有食用安全、营养保健与医疗价值高、生产性能好等特性，已实现大规模工厂化养殖并广泛应用于食品、饲料、水产饵料、医药保健、精细化工等诸多行业，成为当前国内外科学研究与产业化开发规模最大、应用领域最广的经济微藻，我国的藻粉产量近占世界总产量的一半。螺旋藻藻丝在分类学上典型的形态学特征为由多个柱状细胞串联成丝状、不分枝、有规则、疏松或紧密的螺旋形，但在某些条件下会发生多形性变异甚至完全变直。众多实验研究与生产实践表明，螺旋藻的螺旋形态是其工厂化培殖生产中重要的经济性状。螺旋形态不仅有利于藻体上浮和游动，显著提高光能和养分利用率，而且可用简便的筛绢过滤方式低成本采收。当藻丝一旦变直失去其螺旋形态，就难以恢复到螺旋形，并给生产带来产量和质量急骤下降、难以采收及易受其它生物污染等严重后果，生产上称这种“不可逆”的变异为藻种退化。据不完全统计，仅我国每年因藻丝变直导致藻种退化等严重生产问题所造成的经济损失至少上亿元。为解决这一生产重大难题，有必要通过研究阐明螺旋藻藻丝变直的内在机理及影响因素。而建立从螺旋藻螺旋形和直线形混合藻丝群体，简便、高效、批量式筛选出螺旋形藻丝的方法，是开展上述研究及复壮良种的必要前提。国内外至今仍沿用“在显微镜下挑取螺旋形藻丝单体→经约1个月培养成藻丝群体→显微镜检测→若含直线形藻丝，则再挑取螺旋形藻丝单体培养→……→直至获得螺旋形藻丝群体”，这一筛选螺旋形螺旋藻藻丝的传统方法，工序繁琐、耗时长、成功率低。因此，有必要建立能从螺旋藻螺旋形和直线形混合藻丝群体，简便、高效、批量式筛选出螺旋形藻丝的新方法，以确保螺旋藻形态变异机理研究及生产上良种复壮等迫切需要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，克服现有技术中的不足，提供一种利用三唑酮筛选螺旋形螺旋藻藻丝的方法。

为解决技术问题，本发明的解决方案是：

提供一种利用三唑酮筛选螺旋形螺旋藻藻丝的方法，包括以下步骤：

(1)取适量兼具螺旋形和直线形两种藻丝的螺旋藻藻液，用Zarrouk培养液将其浊度T稀释至0.2；

(2)将稀释后的藻液等量分装为多份，分别加入与藻液等体积、含梯度浓度三唑酮的Zarrouk培养液，将藻液的浊度T稀释至0.1；静置培养60d后，选择呈蓝绿色的藻液，取其中三唑酮浓度最高的一组，其该组藻液中的藻丝全部是螺旋形藻丝。

本发明中，所述含梯度浓度三唑酮的Zarrouk培养液是指：Zarrouk培养液有多份且均含三唑酮，所含三唑酮的浓度以20mg/L为递增梯度。

本发明中，步骤(2)中所述含梯度浓度三唑酮的Zarrouk培养液的配制方法为：