[发明专利]一种结核分枝杆菌抗酸染色剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种结核分枝杆菌抗酸染色剂，属于医药领域。包括试剂A液和B液；每100mlA液包括以下含量的各组分：金胺O 0.25‑0.35g、罗丹明B 0.1‑0.2g、高碘酸0.5‑1.5g、水40‑45ml、苯酚15‑20ml、乙醇20‑25ml、甘油15‑25ml；每100ml B液包括以下含量的各组分：水25‑35ml，盐酸0.5‑1ml，乙醇65‑75ml，孔雀绿0.5‑1.5g。本发明A液和B液两种试剂，能够将传统方法中的三步法改为两步操作即可完成染色，且染色时间由传统的20分钟缩减到2分钟左右，大大提高病菌的检测效率，且抗酸杆菌的颜色有黄绿色变为金黄色，与背景反差更大，更易识别，且产品稳定、方便、快捷。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种快速检测结核分枝杆菌的抗酸色液。

背景技术

肺结核是一种常见的呼吸系统传染性疾病，传播速度很快，若未能及时接受有效诊断及治疗，很容易引发结核杆菌感染其他脏器或系统，比如骨结核、肠道结核、肾脏结核，不仅带给患者较大痛苦，还能提高治疗难度，加速病情进展，延长治疗时间，增加脏器功能衰竭风险。随着我国医疗水平的不断深入发展，对肺结核防控力度的逐步加强，加上民众对于医疗卫生要求的逐渐提高，综合作用之下，很多结核患者获得了及时有效的治疗。但据医学调查显示，肺结核患者发病率仍然居高不下，现已成为全世界突出的公共卫生问题。

而引起肺结核的病菌即为结核分枝杆菌，结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小1～0.4μm；牛分枝杆菌则比较粗短。分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高，约占干重的60％，特别是有大量分枝菌酸包围在肽聚糖层的外面，可影响染料的穿入。结核分枝杆菌在体内外经青霉素、环丝氨酸或溶菌酶诱导可影响细胞壁中肽聚糖的合成，异烟肼影响分枝菌酸的合成，巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌后溶菌酶的作用可破坏肽聚糖，均可导致其变为L型，呈颗粒状或丝状。临床常见的用于结合杆菌检测的方法包括齐-尼氏抗酸染色法、培养法和金胺O荧光染色法等。其中金胺O荧光染色法(抗酸染色液)是通过金胺O染色及复染后，用含有紫外光源的荧光显微镜检查，抗酸杆菌呈亮黄色，而其他细菌及背景中的物质呈暗黄色，这种方法可用低倍镜检，因此能更快速找出分枝杆菌。但该方法中使用了三种试剂，且三步法操作，操作步骤以及检测时间比较长；单使用金胺O对抗酸杆菌进行染色，颜色偏黄绿色，与背景差异不大，不太易识别。在石蜡切片标本中，因石蜡切片在前期福尔马林固定过程中会出现抗原封闭现象，需进行抗原修复。传统抗原修复为EDTA修复法，操作繁琐，无法与现有的试剂合并在一起，增加了操作步骤和检测时间。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提出了一种能够减少试剂应用，且产品稳定，能够更加方便、快捷的提高结核分枝杆菌的检测效率的抗酸染色液。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种结核分枝杆菌抗酸染色剂，包括试剂A液和B液；每100ml所述A液包括以下含量的各组分：金胺O 0.25-0.35g、罗丹明B 0.1-0.2g、高碘酸0.5-1.5g、水40-45ml、苯酚15-20ml、乙醇20-25ml、甘油15-25ml；

每100ml所述B液包括以下含量的各组分：水25-35ml，盐酸0.5-1ml，乙醇65-75ml，孔雀绿0.5-1.5g。

优选的，每100ml所述A液包括以下含量的各组分：金胺O 0.25-0.30g、罗丹明B0.12-0.15g、高碘酸0.8-1.0g、水40-42ml、苯酚16-18ml、乙醇23-25ml、甘油18-20ml。

优选的，每100ml所述A液包括以下含量的各组分：金胺O 0.28g、罗丹明B 0.14g、高碘酸1.0g、水40.5ml、苯酚17ml、乙醇23.5ml、甘油19ml。

优选的，每100ml所述B液包括以下含量的各组分：水28-30ml，盐酸0.8-1ml，乙醇68-70ml，孔雀绿0.8-1.2g。