[发明专利]一种酒蒸黄连的HPLC指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种酒蒸黄连的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：

1)参照物溶液的制备：取生物碱类对照品，加甲醇溶解，即得；所述生物碱类对照品为格兰地新、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小襞碱和小檗红碱；

2)供试品溶液的制备：取待测样品，加体积比为100：1的甲醇-盐酸提取，过滤，取滤液，加甲醇稀释2-5倍，即得；

3)分别吸取参照物溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：Welch XB-C18，规格为：250mm×4.6mm，5μm；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％三氟乙酸溶液为流动相B梯度洗脱；波长346nm，柱温25℃，流速1.00ml/min；梯度洗脱程序如下：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述格兰地新、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、小檗红碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱在参照物溶液中浓度分别为1.36μg/ml，7.12μg/ml,0.643μg/ml,4.176μg/ml,18.33μg/ml,0.515μg/ml,15.708μg/ml和58.32μg/ml。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述待测样品与甲醇-盐酸的质量体积比为0.2g：50ml；所述滤液加甲醇稀释5倍。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述提取为超声提取，时间30min，功率250W，频率40kHz。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤3)所述的分别注入液相色谱仪的参照物溶液和供试品溶液量为10μl。

6.根据权利要求1～5任意一项所述的检测方法，其特征在于：所述待测样品为酒蒸黄连，其指纹图谱中应呈现13个特征峰，与格兰地新参照物相应的峰为峰4，与非洲防己碱参照物相应的峰为峰7，与表小檗碱参照物相应的峰为峰8，与盐酸药根碱参照物相应的峰为峰9，与盐酸黄连碱参照物相应的峰为峰10，与小檗红碱参照物相应的峰为峰11，与盐酸巴马汀参照物相应的峰为峰12，与盐酸小檗碱参照物相应的峰为峰13。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述待测样品为酒蒸黄连，其通过指纹图谱计算的盐酸小檗碱含量大于7％，g/g，盐酸黄连碱的含量大于2％，g/g。