[发明专利]酮还原酶在制备(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的用途及制备

权利要求书

1.一种(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：在反应体系中，利用酮还原酶催化式2化合物即得式1化合物(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇；

所述酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酮还原酶的氨基酸序列由如SEQ IDNO:8所示的核苷酸序列编码。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酮还原酶的浓度为0.5-5U/mL，和/或，所述式2化合物的浓度为10-100g/L。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酮还原酶的浓度为1.90U/mL，和/或，所述式2化合物的浓度为50g/L。

5.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述反应体系中还包括还原型辅酶。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述还原型辅酶为NADH、NADPH和/或FADH₂，和/或，所述还原型辅酶的浓度为0.5-5mM。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述还原型辅酶的浓度为1mM。

8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述NADH和/或所述NADPH由以下步骤制备：在脱氢酶以及供氢体的存在下，将NAD⁺和/或NADP⁺进行还原反应即可。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的脱氢酶为葡萄糖脱氢酶、醇脱氢酶或甲酸脱氢酶；和/或，所述的供氢体为葡萄糖、异丙醇或甲酸盐。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，当所述的脱氢酶为醇脱氢酶时，所述的供氢体为异丙醇；当所述的脱氢酶为葡萄糖脱氢酶时，所述的供氢体为葡萄糖；当所述的脱氢酶为甲酸脱氢酶时，所述的供氢体为甲酸盐。

11.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，

所述的脱氢酶的浓度为10-100U/mL；

和/或，所述NAD⁺或NADP⁺的浓度为0.5-5mM；

和/或，所述的供氢体与所述式2化合物的摩尔比为1:1-10:1；

和/或，所述醇脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:15所示。

12.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于，

所述的脱氢酶的浓度为20-30U/mL；

和/或，所述NAD⁺或NADP⁺的浓度为1mM；

和/或，所述的供氢体与所述式2化合物的摩尔比为5:1。

13.如权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述的脱氢酶的浓度为26.48U/mL。

14.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述反应体系还包括缓冲液；

和/或，所述反应体系还包括助溶剂。

15.如权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲液为磷酸缓冲液或Tris-HCl缓冲液；

和/或，所述助溶剂为DMSO；

和/或，所述助溶剂的体积在反应体系中占5-10％。

16.如权利要求15所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲液的浓度为20-200mM，所述缓冲液的pH为6.5-7.5。