[发明专利]抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法

权利要求书

1.抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤，依托分子生物学和植物病理学研究手段，首先获知水稻品种推广应用稻区的稻瘟病菌种群的无毒基因型结构，其次获知推广应用的水稻品种的主要抗性基因型，然后对两项结果进行比对分析，以及利用稻区菌群对水稻品种进行综合接种，最终高效鉴定出水稻抗性品种是否在拟推广应用的稻区表现抗性。

2.根据权利要求1所述的抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

(1)稻瘟病菌无毒基因型分析

(1.1)获得稻瘟病菌单孢菌株

基于组织分离法，保湿培养在水稻品种拟推广应用稻区采集的穗颈瘟标本，通过孢子培养、飘落、镜检、标记、定位、挑取、培养，获得稻瘟病菌单孢菌株，保存备用；

(1.2)获得稻瘟病菌单孢菌株基因组DNA

利用CTAB法提取稻瘟病菌单孢菌株的基因组DNA；

(1.3)获知稻区稻瘟病菌群的无毒基因结构

利用已构建的稻瘟病菌无毒基因特异性引物，分别PCR扩增稻瘟病菌单孢菌株DNA，通过条带分析，获知单孢菌株的无毒基因型，对此进行数据分析获知菌群的无毒基因结构；

(2)水稻品种抗性基因分析

(2.1)获得抗性品种基因组DNA

利用CTAB法提取稻瘟病菌单孢菌株的基因组DNA；

(2.2)获知水稻品种抗性基因型

利用已构建的水稻品种抗性基因特异性引物，分别PCR扩增水稻品种DNA，通过条带分析，获知水稻品种具有的抗性基因型；

(3)抗性基因型与无毒基因型的比对分析

比较水稻品种的抗性基因型与稻瘟病菌群的无毒基因型，如果抗性基因型与无毒基因型对应存在，表示抗性基因型与无毒基因型契合，该水稻品种在稻区大田生产中具备抗性；如果抗性基因与无毒基因不对应存在，表示抗性基因型与主要无毒基因型不契合；

(4)水稻品种稻瘟病抗性室内接种鉴定分析

于室内对抗性基因与无毒基因不对应存在的水稻品种进行喷雾接种稻瘟病菌群的混合分生孢子液，7d后获得抗性结果；

如果稻瘟病抗性鉴定结果为抗性，表明检测出的抗性基因型与无毒基因型虽然不对应存在，但是表明水稻品种具有未知的抗性基因，稻瘟病菌群具有未知的无毒基因型，且二者对应存在，在大田生产中该水稻品种对稻瘟病具有抗性；

如果稻瘟病抗性鉴定结果为感病，表明该水稻品种中的抗性基因与稻瘟病菌群的无毒基因型不存在契合，在大田生产中该水稻品种对稻瘟病不具有抗性。