[发明专利]蜡样芽孢杆菌发酵培养基和提高蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质活性的发酵方法

说明书

本发明公开蜡样芽孢杆菌发酵培养基和提高蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质活性的发酵方法，蜡样芽孢杆菌发酵培养基由以下组分制成：碳源、氮源、无机盐和纯水；所述碳源为废糖蜜，或者玉米淀粉和废糖蜜的混合物；所述氮源为酵母浸出物、牛肉膏、蛋白胨、氯化铵中的一种或几种的混合物；所述无机盐氯化钠；所述发酵培养基的pH值范围为5.5～8.0。蜡样芽孢杆菌发酵培养基选用能够为蜡样芽孢杆菌的生长提供充足营养的碳源和氮源，使得蜡样芽孢杆菌能够更好更快地生长繁殖，提高蜡样芽孢杆菌的活菌数量。本发明还提供一种提高蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质活性的发酵方法，确保蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质的活性保持在较高水平。

【技术领域】

本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其是蜡样芽孢杆菌发酵培养基和提高蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质活性的发酵方法。

【背景技术】

南方水稻种植期间害虫轮流发生，以稻飞虱、稻纵卷叶螟、二化螟、三化螟的危害性最大，为了降低水稻害虫的发生率，防止化学农药的滥用，开发新型的生物农药是解决手段之一。与传统的化学农药相比，生物农药具有对人畜和非靶标生物安全，环境兼容性好，不易产生抗性，易于保护生物多样性，来源广等优点。因此，高效生物农药的开发应用对人类健康，环境保护和农业的可持续发展都有极其重大的意义。目前中药植物源农药已成为生物合理性农药研究开发的热点之一。中药植物中的豆科是我国三大植物源农药资源之一，豆科植物具有黄酮类化合物、生物碱类化合物、杀虫凝集素等杀虫活性成分中。所以有必要分离豆科植物内生菌寻找新的生物农药资源。

南药水黄皮(Pongamia pinnata(Linn.)Pierre)为豆科水黄皮属植物，也是一种典型的半红树植物，《中华本草》中记载，秋季果实成熟时采收，打下水黄皮种子晒干，味苦性寒小毒，可祛风除湿，解毒杀虫，主治风湿痹痛、癣疥、脓疮。蜡样芽孢杆菌(SeB3)是从水黄皮种子部位分离获得的一株对水稻害虫稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalisGuenee)具有较强杀虫活性的菌株，经16SrDNA序列系统发育学分析，将进行该菌株鉴定为腊样芽胞杆菌(B.cereus)。

要将蜡样芽胞杆菌SeB3开发成商业化的新型生物杀虫剂产品，首先要解决菌株大量繁殖难的问题，同时确保其代谢产物杀虫活性保持在较高水平，为进一步实现SeB3研发成高效、广谱、无公害、低成本的新型生物杀虫剂打下基础。

【发明内容】

本发明的目的在于提供一种蜡样芽孢杆菌发酵培养基，解决菌株大量繁殖难的问题；本发明还提供一种提高蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质活性的发酵方法，确保蜡样芽孢杆菌产杀稻纵卷叶螟物质的活性保持在较高水平。

为解决上述蜡样芽孢杆菌菌株大量繁殖难的问题，本发明提供一种蜡样芽孢杆菌发酵培养基，由以下组分制成：

碳源、氮源、无机盐和纯水；

所述碳源为废糖蜜，或者玉米淀粉和废糖蜜的混合物；

所述氮源为酵母浸出物、牛肉膏、蛋白胨、氯化铵中的一种或几种的混合物；

所述无机盐为氯化钠；所述发酵培养基的pH值范围为5.5～8.0。

作为本发明优选的一种蜡样芽孢杆菌发酵培养基由以下质量比的组分制成：2％废糖蜜、0.5～1.5％牛肉膏、0.5％氯化钠以及余量的纯水；所述发酵培养基的pH值为6.5～7.5。

优选的，所述发酵培养基的pH值为7.0。

作为本发明优选的一种蜡样芽孢杆菌发酵培养基由以下质量比的组分制成：2％废糖蜜和玉米淀粉的混合物、1％牛肉膏、0.5％氯化钠以及余量的纯水，所述废糖蜜和玉米淀粉的质量比为1:1，所述发酵培养基的pH值为6.5～7.5。