[发明专利]一种流式单细胞质谱分析仪及其使用方法有效
申请号: | 201910588235.X | 申请日: | 2019-07-02 |
公开(公告)号: | CN110333282B | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 张新荣;徐富建;姚欢;潘星宇;张四纯 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | G01N27/64 | 分类号: | G01N27/64 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 王胥慧 |
地址: | 100084 北京市海淀区1*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 流式单 细胞质 谱分析 及其 使用方法 | ||
1.一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,包括进样室、电离室、质谱检测器、前级机械泵和分子泵;
所述进样室内设置有进样系统、流体聚焦装置和加热干燥装置,所述进样系统为注射泵和/或流式细胞仪,所述进样系统的出口连接所述流体聚焦装置,所述流体聚焦装置用于将细胞分散液在载气的驱动下聚焦生成含有单细胞样品的微滴,即流体聚焦装置的小孔聚焦后在流体聚焦装置的管口形成锥形结构,并在锥形结构的顶端形成一股微射流,该微射流在小孔外破碎成单分散性的含有待测细胞样品的微滴;所述流体聚焦装置的出口连接所述加热干燥装置,所述加热干燥装置用于对含有单细胞样品的微滴进行加热干燥形成单细胞颗粒束流;
所述加热干燥装置的出口连接所述电离室,所述电离室内设置有真空离子化激光源、加速电极和离子聚焦透镜,所述真空离子化激光源用于向单细胞颗粒束流发射脉冲激光束以形成离子,所述加速电极用于对形成的离子进行加速,所述离子聚焦透镜用于对加速后的离子进行聚焦;所述电离室的出口连接所述质谱检测器;
所述电离室和质谱检测器均依次连接一所述前级机械泵和分子泵。
2.如权利要求1所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述离子聚焦透镜是由一个或多个静电控制的透镜元件组成。
3.如权利要求2所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述静电控制的透镜元件包括施加静电的金属板或金属桶。
4.如权利要求1所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述进样系统的出口通过进样毛细管连接所述流体聚焦装置。
5.如权利要求1所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述电离室与所述质谱检测器相互垂直设置。
6.如权利要求1至5任一项所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述真空离子化激光源的激发波长为133~2500nm,脉宽范围为1~50ns,重复频率为1~15KHz。
7.如权利要求1至5任一项所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述质谱检测器为四级杆质谱仪、飞行时间质谱仪和/或离子阱质谱仪。
8.如权利要求1至5任一项所述的一种流式单细胞质谱分析仪,其特征在于,所述载气的压强范围为0.1~0.5MPa。
9.一种流式单细胞质谱分析仪的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)前级机械泵和分子泵依次分别对电离室和质谱检测器抽真空,使得电离室和质谱检测器达到极限真空度;
2)将待测细胞分散在缓冲液得到待测细胞的细胞分散液,吸入至进样系统中;
3)进样系统推动待测细胞的细胞分散液经进样毛细管进入流体聚焦装置中,在载气的驱动下,经流体聚焦装置的小孔聚焦后在流体聚焦装置的管口形成锥形结构,并在锥形结构的顶端形成一股微射流,该微射流在小孔外破碎成单分散性的含有待测细胞样品的微滴;
4)生成的含有待测单细胞样品的微滴进入加热干燥装置内进行加热干燥,形成待测单细胞颗粒束流;
5)形成的待测单细胞颗粒束流在载气的带动下进入电离室,被真空离子化激光源发出的脉冲激光束解吸电离形成离子;
6)形成的离子依次经加速电极加速、离子聚焦透镜聚焦和质谱检测器检测后,得到待测单细胞的质谱。
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