[发明专利]一种抑制肝星状细胞活化药物的制备及应用

说明书

本发明公开了一种中药鹅不食草活性单体成分心菊内酯的制备及其应用。从中药鹅不食草中分离出单体化合物心菊内酯，并实验证明其可有效抑制肝星状细胞活化增殖，减轻胶原沉积、减少炎症相关蛋白的合成，其机制可能与抑制PI3K/Akt通路信号传导有关。为治疗肝纤维化提供了一种新的有效抑制肝星状细胞活化的中药单体。

技术领域

本发明涉及一种药物的制备方法及应用，具体来说，涉及中药鹅不食草活性单体成分心菊内酯的提取、分离方法；心菊内酯对活化肝星状细胞的抑制作用。

背景技术

肝纤维化是肝脏对炎症、病毒等因素引起的急慢性肝损伤的一种修复反应，可进一步发展成肝硬化或肝癌，严重威胁人民群众的生命健康。肝星状细胞的活化增殖被认为是肝纤维化发生、发展的中心环节。肝纤维化治疗的核心策略就是抑制肝星状细胞活化增殖。我国传统医学研究工作者在中医药理论和长期临床实践的基础上，对中医药抗肝纤维化作了大量研究，在治疗肝纤维化方面取得了良好的效果。

鹅不食草(Centipedae Minima(L.)A.Braun etAschers.)系菊科石胡荽属植物的干燥全草。本发明对中药鹅不食草进行了大量的药学、药效学研究，从鹅不食草中提取分离得到一种活性单体成分心菊内酯。经长期大量的研究发现，心菊内酯能够显著抑制肝星状细胞活化增殖、减轻胶原沉积、减少炎症相关蛋白的合成，促进肝星状细胞的凋亡，其机制可能与抑制PI3K/Akt通路信号传导有关。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种新的有效抑制肝星状细胞活化的中药单体，缓解肝纤维化治疗效果较差的问题。

本发明采用的技术方案如下：

1、从中药鹅不食草中分离出单体化合物心菊内酯；

2、心菊内酯对肝星状细胞的抑制作用实验；

3、中药鹅不食草活性单体成分心菊内酯在抑制肝星状细胞增殖药中的应用；

4、中药鹅不食草活性单体成分心菊内酯在促进肝星状细胞凋亡药中的应用。

本发明从中药鹅不食草中分离出单体化合物心菊内酯，并证明其能够显著抑制肝星状细胞活化增殖，减轻胶原沉积、减少炎症相关蛋白的合成、促进肝星状细胞的凋亡，其机制可能与抑制PI3K/Akt通路信号传导有关，为治疗肝纤维化提供了一种新的有效抑制肝星状细胞活化的中药单体。

具体实施方式

一、心菊内酯的制备

提取分离方法：取5kg鹅不食草干燥全草，粉碎，95％乙醇加热回流提取3次，每次2h，合并3次乙醇提取液，减压除去乙醇，得到鹅不食草乙醇浸膏880g。取乙醇浸膏加适量蒸馏水重悬，0.45um滤头过滤，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得乙酸乙酯萃取物126.8g。以硅胶(1.5kg，200-300目)柱色谱柱分离，PE：EtOAc(7:1,4:1，3:1，2:1，1:1，1:2)，EtOAc，EtOAc(5％MeOH)，EtOAc(10％MeOH)，EtOAc(20％MeOH)梯度洗脱，薄层色谱收集相同馏分，其中，第八馏分再经硅胶柱(氯仿：甲醇，90:10)和Sephadex LH-20柱(甲醇：水，1:1)进一步分离纯化，最后得到白色晶体25.8mg。