[发明专利]一种基于CRISPR的细胞核靶向药物递送系统

权利要求书

1.一种基于CRISPR的细胞核靶向药物递送组合物，其特征在于，由以下部分组成：药物载运部分、CRISPR靶向部分、连接酶核苷酸序列和第一连接分子，

其中，所述药物载运部分由药物活性剂、纳米载体粒子、第二连接分子和包裹DNA构成，所述药物活性剂荷载在所述纳米载体粒子上，所述第二连接分子与所述纳米载体粒子连接，所述包裹DNA包裹所述药物活性剂，所述包裹DNA包含寡核苷酸序列，所述寡核苷酸序列在端粒酶存在下延伸以使所述包裹DNA形成发夹状结构；所述CRISPR靶向部分由核酸酶缺陷型Cas9核苷酸序列dCas9、连接酶受体肽核苷酸序列和端粒sgRNA核苷酸序列构成；

其中，当将所述药物载运部分、所述CRISPR靶向部分、所述连接酶核苷酸序列和所述第一连接分子导入细胞内时，所述CRISPR靶向部分表达dCas9蛋白、连接酶受体肽和端粒sgRNA，所述dCas9蛋白和所述连接酶受体肽形成融合蛋白，所述端粒sgRNA与所述融合蛋白形成dCas9-连接酶受体肽/端粒sgRNA复合物；所述连接酶核苷酸序列表达连接酶，所述连接酶使所述第一连接分子与所述dCas9-连接酶受体肽/端粒sgRNA复合物连接；所述第一连接分子与所述第二连接分子发生连接；

其中，所述连接酶为硫辛酸连接酶Lp1A，所述连接酶受体肽为硫辛酸连接酶受体肽LAP，所述第一连接分子为反式环辛烯TCO2，所述第二连接分子为四嗪Tzl；或者，所述连接酶为生物素连接酶BirA，所述连接酶受体肽为生物素连接酶受体肽BAP，所述第一连接分子为生物素biotin，所述第二连接分子为链霉亲和素SA；

所述纳米载体粒子为介孔二氧化硅纳米粒子MSN；

所述包裹DNA包含的寡核苷酸序列为5’-(CCC TAA)₆ AAT CCG TCG AGC AGA GTT-3’(SEQ ID NO: 1)，所述端粒sgRNA核苷酸序列为5’-TAG GGT TAG GGT TAG GGT TA-3’(SEQID NO: 2)；

所述药物活性剂为多柔比星。

2.根据权利要求1所述的基于CRISPR的细胞核靶向药物递送组合物，其特征在于，所述药物载运部分以脂质体形式提供。

3.根据权利要求1所述的基于CRISPR的细胞核靶向药物递送组合物，其特征在于，所述连接酶核苷酸序列以质粒形式提供。

4.根据权利要求1所述的基于CRISPR的细胞核靶向药物递送组合物，其特征在于，所述CRISPR靶向部分以质粒的形式提供。