[发明专利]促进生物素合成的方法、促进生物素合成的重组细胞和基因工程菌在审
| 申请号： | 201910591872.2 | 申请日： | 2019-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN112175983A | 公开（公告）日： | 2021-01-05 |
| 发明（设计）人： | 徐志南;朱勇刚;周斌;肖峰 | 申请（专利权）人： | 浙江圣达生物药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/78 | 分类号： | C12N15/78;C12N1/21;C12R1/40 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 刘晓春 |
| 地址： | 317299 浙江省台*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 促进 生物素 合成 方法 重组 细胞 基因工程 | ||
1.促进生物素合成的方法，其特征在于，将枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis168)生物素合成操纵子bioWAFDBI中各个生物素合成基因bioW(SEQ ID NO.1)、bioA(SEQID NO.2)、bioF(SEQ ID NO.3)、bioD(SEQ ID NO.4)、bioB(SEQ ID NO.5)和bioI(SEQ IDNO.6)单独克隆并进行重排，通过强启动子过表达上述重排的生物素合成基因簇，从而促进生物素的高效合成；其中，生物素合成基因bioW编码庚二酸辅酶A合成酶，生物素合成基因bioA编码7，8-二氨基壬酸转氨酶，生物素合成基因bioF编码7-酮基-8-氨基壬酸合成酶，生物素合成基因bioD编码脱硫生物素合成酶，生物素合成基因bioB编码生物素合成酶，生物素合成基因bioI编码裂解长链脂肪酰基-ACP生成庚二酸-ACP的P450氧化酶。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，基因bioW和bioI来自于枯草芽孢杆菌168，基因bioA、bioF、bioD和bioB来自于枯草芽孢杆菌168或其它含有相应基因的微生物。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述基因bioA、bioF、bioD和bioB来自其它含有相应基因的微生物，包括来自铜绿假单胞菌PAO1的生物素合成基因bioA、bioF、bioD和bioB，或者大肠杆菌MG1655的生物素合成基因bioA、bioF、bioD和bioB或者恶臭假单胞菌KT2240的生物素合成基因bioA、bioF、bioD和bioB。
4.一种促进生物素合成的重组细胞，其特征在于，该细胞含有枯草芽孢杆菌来源的bioW和bioI以及枯草芽孢杆菌或其他微生物来源的bioA、bioF、bioD、bioB。
5.一种高效合成生物素的基因工程菌，其特征在于，含有SEQ1～6所示DNA序列。
6.一种高效合成生物素的重组细胞，其特征在于，含有SEQ1～6所示DNA序列。
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