[发明专利]一种L-丝氨酸的制备方法

权利要求书

1.一种L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

采用物理法对菌体进行细胞破碎，得细胞破碎物；

对所述细胞破碎物进行加压孵育，得孵育混合物；

向所述孵育混合物中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛，并在氮气氛围下进行酶促反应，待达到酶促反应平衡，制得L-丝氨酸；

其中，所述菌体中含有丝氨酸羟甲基转移酶；

对所述细胞破碎物进行加压孵育，得孵育混合物的步骤，包括：

先对所述细胞破碎物进行空气加压孵育，然后再进行氮气加压孵育，得孵育混合物；

向所述孵育混合物中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛，并在氮气氛围下进行酶促反应，待达到酶促反应平衡，制得L-丝氨酸的步骤中：

所述酶促反应过程中的氮气压力为0.05～0.2bar。

2.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，采用物理法对菌体进行细胞破碎，得细胞破碎物的步骤，包括：

将菌体重悬于Tris-HCl缓冲液中，在压力500～800bar、流速6～10L/h的条件下，采用细胞破碎仪进行细胞破碎，得细胞破碎物。

3.如权利要求2所述的L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，将菌体重悬于Tris-HCl缓冲液中，在压力500～800bar、流速6～10L/h的条件下，采用细胞破碎仪进行细胞破碎，得细胞破碎物的步骤中：

所述Tris-HCl缓冲液的pH值为6.0～8.0。

4.如权利要求2所述的L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，将菌体重悬于Tris-HCl缓冲液中，在压力500～800bar、流速6～10L/h的条件下，采用细胞破碎仪进行细胞破碎，得细胞破碎物的步骤中：

所述菌体与所述Tris-HCl缓冲液的固液比为0.05～0.1kg/L。

5.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，先对所述细胞破碎物进行空气加压孵育，然后再进行氮气加压孵育，得孵育混合物的步骤中：

所述空气加压孵育时的空气压力为4～8bar，孵育时间为4～6h；

所述氮气加压孵育时的氮气压力为0.05～0.2bar，孵育时间为25～35min。

6.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，向所述孵育混合物中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛，并在氮气氛围下进行酶促反应，待达到酶促反应平衡，制得L-丝氨酸的步骤中：

所述酶促反应体系中，所述甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛的浓度对应为2～2.8mol/L、0.2～0.4mmol/L、3～5mmol/L和8～13mmol/L，且所述酶促反应体系的pH值为6.0～8.0。

7.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法，其特征在于，向所述孵育混合物中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛，并在氮气氛围下进行酶促反应，待达到酶促反应平衡，制得L-丝氨酸的步骤中：

所述酶促反应过程中的搅拌速率为100～150rpm，反应温度为35～40℃，反应时间为18～24h。