[发明专利]一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法

权利要求书

1.一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：配制发酵培养基，灭菌，控制发酵培养基的pH为4.5-5.5；

S2：向发酵培养基中添加柠檬酸钙，使得培养基中柠檬酸钙的浓度为0.5~1.5g/L；

S3：向发酵培养基中接种黑曲霉，然后在发酵罐中进行发酵；

S4：将发酵后的液体通过微滤膜过滤，并经过多次加水稀释冲洗发酵液，得到透过液和截留液，透过液为纤维素二糖酶液，截留液为含有几丁质的菌体细胞；

S5：将S4中获得的截留液放入反应液中进行电解，得到几丁质；

所述发酵培养基的成分为：葡萄糖10-20g/L，纤维素粉10-20g/L，蛋白胨10-15g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，硫酸镁0.1-0.2g/L；

所述黑曲霉为购自于中国普通微生物菌种管理保藏中心的保藏编号为CGMCC NO.3.11447的黑曲霉。

2.根据权利要求1所述的一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，所述黑曲霉在发酵培养基中的接种量为5-10%（v/v）。

3.根据权利要求1所述的一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，所述发酵培养基在发酵罐中于温度121-126℃下灭菌20-60min。

4.根据权利要求1所述的一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，进行发酵的条件为：温度25℃-34℃，发酵液pH控制为4.5-5.5，发酵罐内搅拌转速250 r/min -550r/min，通气量2 L/min-20 L/min，罐压0.03 MPa -0.06 MPa。

5.根据权利要求1所述的一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，所述微滤膜规格为0.2μm的微滤膜。

6.根据权利要求1所述的一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，微滤膜过滤时，补充1-3倍的水，来稀释冲洗发酵液，使纤维二糖酶充分被提取。

7.根据权利要求1所述的一种联产纤维二糖酶和几丁质的方法，其特征在于，将截留液放入反应液中进行电解得到几丁质的具体方法为：采用电解法分离几丁质，电压10~50V，反应液为质量分数0.1~10%的NaOH溶液，绝缘板上铺绝缘介质，用反应液滤湿，在绝缘介质上铺一层匀浆破碎的黑曲霉湿菌体，反应时间10~2000min，把电解后的物质洗涤并干燥，得到几丁质。