[发明专利]疾病治疗、预防与保健的外泌体、药物载体及提取方法

说明书

本发明属于中药技术领域，公开了一种疾病治疗、预防与保健的外泌体、药物载体及提取方法，所述疾病治疗、预防与保健的外泌体、药物载体来自于中药。取中药捣烂研磨4摄氏度高速搅拌，收集汁分别在2000g离心和10000g离心，去除残渣；用150000g离心，用PBS洗涤一次，用梯度分别为8％、30％、45％和60％的蔗糖进行纯化和分离；上清液离心后，再150000×g离心；8％/30％层和30％/45％层之间的条带分别被采集并记录为外泌体样囊泡，经电镜检测、粒径检测等确认为中药外泌体并将其应用于健康产业。本发明提取了中药外泌体或通过中药外泌体携带药物应用于健康产业，包括疾病治疗、预防的药品和健康保健品的研发。

技术领域

本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种中药外泌体在疾病治疗、预防与保健中的应用及提取方法。

背景技术

目前，中药在疾病治疗、预防与保健中具有越来越重要的作用而备受重视，但是现有的使用方法可能难以让中药的作用得到很好发挥。国内外对于中药在疾病治疗预防和保健中主要有两种应用方式：一是传统炮制方法。传统炮制方法十分繁多，包括熬、煮、焙、蒸、炒、蜜制、醋制和酒制等，一般以高温煎熬为主；二是采用现代工艺技术提取中药中的有效化学成分。包括溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界提取法和超声波提取法等，这些方法多数采用高温的方式，高温破坏了中药中的热敏成分；即便是低温，其着眼点也仅仅是中药的一种或几种化学成分，而未涉及中药外泌体的提取与应用。

外泌体(Exsomes，EVs)是一种囊性小泡，是细胞通过内吞-融合-外排等一系列生物学机制产生并通过主动分泌作用排出细胞外的囊性小泡，其本质是脂质双分子层，它是细胞通过主动分泌作用产生并排出胞外的。外泌体在细胞间的信息交流以及物质传递方面均发挥着及其重要的作用，而随着医疗技术水平日益完善，使得外泌体在疾病的早期诊断、临床治疗及其预后中发挥不可或缺的作用。一般来说，外泌体的分子直径约为25-200nm。外泌体形态呈杯型或双凹碟型，在人体体液中呈球状。外泌体内含有多种RNA、蛋白质、脂质、DNA等物质，参与调节细胞各项生理功能，具有多种生物学作用。研究证明外泌体不仅在正常细胞内发挥作用，外泌体及其内部成分也广泛参与到人体病理生理学中。但是提取中药外泌体用于疾病的预防、治疗和保健目前尚未有报道。

综上所述，现有技术存在的问题是：利用了中药中的化学成分而未能利用中药的外泌体，没有充分利用中药的有效成分。外泌体所含成分丰富，作用较多，但由于有囊膜包裹，没有常规技术制作的中药制剂的副作用，在开发注射剂的药品或保健品中具有突出优点。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种疾病治疗、预防与保健的中药及提取方法与应用，应用于健康产业。

本发明是这样实现的，一种疾病治疗、预防与保健的外泌体，所述用于疾病治疗、预防与保健的成分为中药外泌体。

本发明的另一目的在于提供一种利用上述的外泌体作为用于疾病治疗、预防与保健的药物载体。

本发明的另一目的在于提供一种所述疾病治疗、预防与保健的中药外泌体的提取方法，所述提取方法具体包括：

取新鲜中药捣烂研磨4摄氏度高速搅拌，收集汁分别在2000g离心和10000g离心，去除残渣；

用150000g离心，用PBS洗涤一次，用梯度分别为8％、30％、45％和60％的蔗糖进行纯化和分离；

上清液经150000×g离心后，再悬浮于PBS中，转入梯度为8％/15％/30％/45％/60％的蔗糖，150000×g离心；8％/30％层和30％/45％层之间的条带分别被采集并记录为外泌体样囊泡。

进一步，所述提取方法具体包括：

取中药捣烂研磨4度高速搅拌1分钟，收集汁分别在2000g离心20min和10000g离心1h，去除残渣。