[发明专利]一种磁珠悬浮溶液及其使用方法在审
申请号: | 201910595352.9 | 申请日: | 2019-07-03 |
公开(公告)号: | CN110283814A | 公开(公告)日: | 2019-09-27 |
发明(设计)人: | 包文静;金安娜;高伙妮;龚伟 | 申请(专利权)人: | 上海睿璟生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201100 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 磁珠 悬浮溶液 体积分数 氯化钠 生物缓冲剂 产品操作 产品价格 核酸纯化 聚乙二醇 仪器要求 磁力架 分散剂 试剂盒 通量 羧基 回收率 回收 | ||
1.一种磁珠悬浮溶液,其特征在于,包括以下原料:终浓度为0.1-2mol/L的生物缓冲剂、终浓度为10-500ng/μL的硅羧基磁珠、终浓度为1-20mol/L的氯化钠、体积分数为0.1-5%的分散剂和体积分数为10-50%的聚乙二醇,磁珠悬浮溶液的pH值为6-9。
2.根据权利要求1所述的磁珠悬浮溶液,其特征在于,所述分散剂采用吐温20,生物缓冲剂采用三羟甲基氨基甲烷。
3.根据权利要求1或2所述的磁珠悬浮溶液,其特征在于,所述聚乙二醇的相对分子量为1000-10000。
4.一种如权利要求1-3任一所述的磁珠悬浮溶液进行DNA纯化的使用方法,其特征在于,具体步骤如下:
步骤一,将磁珠悬浮溶液从2-8℃冰箱中取出,室温下孵育25-35分钟;
步骤二,将待纯化的核酸样本加入磁珠悬浮溶液中,然后混合均匀,在室温下孵育2-10分钟,静置直至液体澄清,分离得到上清液和沉淀;
步骤三,将沉淀转移至新试管中并且用乙醇清洗2-3次,弃残液,然后洗脱DNA,室温静置2-6分钟,然后放置在磁力架上,得到的上清液即纯化后的DNA产物。
5.根据权利要求4所述的磁珠悬浮溶液进行DNA纯化的使用方法,其特征在于,所述磁珠悬浮溶液在使用前采用涡旋混匀器混合均匀。
6.根据权利要求4或5所述的磁珠悬浮溶液进行DNA纯化的使用方法,其特征在于,所述步骤三中乙醇的体积分数为80%。
7.一种如权利要求1-3任一所述的磁珠悬浮溶液进行DNA片段筛选的使用方法,其特征在于,具体步骤如下:
步骤一,将磁珠悬浮溶液从2-8℃冰箱中取出,室温下孵育25-35分钟;
步骤二,将待纯化的核酸样本加入磁珠悬浮溶液中,然后混合均匀,在室温下孵育2-10分钟,静置直至液体澄清,分离得到上清液和沉淀;
步骤三,将沉淀转移至新试管中并且加入磁珠悬浮液,混匀并且在室温下孵育2-10分钟,静置直至澄清,将上清液转移至新试管中并且加入磁珠悬浮溶液,混匀并且在室温下孵育2-10分钟,再用乙醇清洗2-3次,弃残液,然后洗脱DNA,室温静置2-6分钟,然后放置在磁力架上,得到的上清液即纯化后的DNA产物。
8.根据权利要求7所述的磁珠悬浮溶液进行DNA片段筛选的使用方法,其特征在于,所述步骤三中采用低盐溶液或无核酸酶水洗脱DNA。
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