[发明专利]与藏绵羊耐低氧性能相关的遗传标记及其应用在审
| 申请号： | 201910595434.3 | 申请日： | 2019-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN110241232A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 刘秀;何建文;胡江;王继卿;李少斌;罗玉柱;沙玉柱;张伟 | 申请（专利权）人： | 甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 席勇 |
| 地址： | 730070 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 藏绵羊 低氧 遗传标记 等位基因 分子育种 辅助选育 基因 应用 | ||
1.与藏绵羊耐低氧性能相关的遗传标记，其特征在于，其位于HMOX2基因上，存在等位基因A7、B7，当所述等位基因为A7、B7时，所述藏绵羊高原低氧适应性良好；
所述等位基因A7，在HMOX2基因第c.20911处的碱基为C，在第c.20990处的碱基为T；
所述等位基因B7，在HMOX2基因的第c.20911处的碱基为T，第c.20990处处的碱基为C。
2.用于检测权利要求1所述遗传标记的引物对，其特征在于，所述引物对为：
上游引物：GGACCAGAGGCGTGAGA；
下游引物：GGTGGGAGACACTGGAAAG。
3.用于检测藏绵羊耐低氧性能的试剂盒。
4.权利要求1所述的遗传标记在鉴定藏绵羊耐低氧性能中的应用，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测藏绵羊的基因组DNA；
(2)以待测藏绵羊的基因组DNA为模板，利用权利要求2中所述的引物对进行PCR扩增；
(3)鉴定PCR扩增产物，当所述等位基因为A7、B7时，所述藏绵羊耐低氧性能良好；
所述等位基因A7，在HMOX2基因第c.20911处的碱基为C，在第c.20990处的碱基为T；
所述等位基因B7，在HMOX2基因的第c.20911处的碱基为T，第c.20990处处的碱基为C。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增时的扩增体系以20μL计为，Mix试剂10μL，dd H2O 8.4μL，上、下游引物各0.4μL，DNA模板0.8μL。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增时的PCR反应条件为：95℃，5min；94℃，Tm(退火温度)，30s；72℃，30s；35个循环；72℃，10min；4℃保存，使用1.2％的琼脂糖凝胶电泳进行检测。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述鉴定PCR扩增产物是采用SSCP进行鉴定，包括将PCR产物2μL和变性缓冲液8μL混匀后在105℃变性10min，点样于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳板上，电泳结束后根据银染方法显色并判定电泳带型。
8.权利要求1所述的遗传标记在藏绵羊分子标记辅助育种中的应用。
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