[发明专利]一种复合自养硝化菌、其固体菌剂的制备方法和在含高盐分和高氨氮的污水处理的应用

权利要求书

1.一种复合自养硝化菌，是由芽孢杆菌和假单胞菌的菌悬液按体积比1:2.5混合制得；

所述芽孢杆菌菌悬液所含活菌数为1×10⁹ CFU/mL，所述假单胞菌菌悬液所含活菌数为1×10⁹CFU/mL；

所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ATCC 6633，所述假单胞菌为铜绿假单胞菌BNCC185967；

所述芽孢杆菌和假单胞菌的菌悬液的制备方法包括如下步骤：

（1）分别将保存的芽孢杆菌和假单胞菌接种于固体培养基，在30℃恒温培养箱中进行培养，培养时间为10-15天，分别得到活化后的芽孢杆菌和假单胞菌；

（2）将活化后的芽孢杆菌和假单胞菌分别从固体培养基上接种至扩培培养基，在30℃恒温摇床中、以转速150r/min进行富集培养，培养时间为3-7天，分别得到芽孢杆菌和假单胞菌的菌悬液；

所述固体培养基为(NH₄)₂SO₄ 1.2 g/L、NaCl 8 g/L、NaNO₂ 0.5 g/L、FeSO₄ 0.03 g/L、MgSO₄ 0.03 g/L、K₂HPO₄ 1.31 g/L、CaCO₃ 5 g/L、微量元素 10 mL/L、水洗琼脂 15-20 g/L；

所述扩培培养基为CH₃COONa 0.5 g/L、(NH₄)₂SO₄ 2 g/L、NaHCO₃ 5 g/L、KH₂PO₄ 1 g/L、MgSO₄ 0.5 g/L、KCl 0.5 g/L、FeSO₄ 0.5 g/L、CaCl₂ 0.1g/L、微量元素 10 mL/L；

所述微量元素具体配方：H₃BO₃ 0.05 g/L、ZnSO₄ 0.1 g/L、MnSO₄ 0.4 g/L、(NH₄)₆MO₇O₂.4H₂O 0.2 g/L、CoSO₄.7H₂O 2.36 g/L、CuSO₄.5H₂O 0.15 g/L、Na₂WO₄.2H₂O 0.5g/L。

2.根据权利要求1所述的一种复合自养硝化菌，其特征在于：所述固体培养基和扩培培养基的初始pH为7-9，用高压灭菌锅在121℃，灭菌30min。

3.权利要求1所述复合自养硝化菌的固体菌剂的制作方法，包括以下步骤：

（1）将复合自养硝化菌的菌悬液与保护剂按质量比10:1充分混合；

（2）将固体辅料于高压灭菌锅中121℃，灭菌30min，冷却至40-45℃后与加了保护剂的复合菌菌悬液按1:0.8混合均匀，于烘箱中45℃常压通风烘干24h，控制固体菌剂的水含量为8-10%。

4.根据权利要求3所述的固体菌剂的制作方法，其特征在于：所述保护剂为甘油，所述固体辅料为麸皮。

5.权利要求1所述复合自养硝化菌在含高盐分和高氨氮的污水处理的应用，所述复合自养硝化菌的耐受盐分范围为1-2.1wt%，处理氨氮浓度范围为300-500mg/L，所需溶解氧浓度范围为2-6mg/L，pH为6.8-8.8。