[发明专利]干细胞冻存液及干细胞冻存和复苏方法

说明书

本发明提供了一种可用于临床的干细胞冻存液及干细胞冻存和复苏方法，通过本发明的技术方案，可以为临床提供质量稳定，标准明确的干细胞冻存液。

技术领域

本发明属于生物材料冻存技术领域，尤其涉及一种临床可用的干细胞冻存液及干细胞冻存和复苏方法。

背景技术

间充质干细胞广泛存在于全身结缔组织和器官间质中，以骨髓组织中含量

最为丰富，也可从胎儿脐血中分离得到，此外还存在于胎盘、羊水、脐静脉内皮下层、外周血及肝脏、脂肪、肌肉、皮肤等多种组织中。间充质干细胞具有高度增殖、自我更新和多向分化潜能，间充质干细胞不仅能够向多种组织和细胞分化，而且易于分离、培养、扩增，易于外源基因的导入和表达，在体外长期培养过程中始终保持多向分化的潜能，遗传背景相当稳定。

1995年间充质干细胞首次应用于临床应用，2012年Osiris公司申报间充质干细胞作为药品上市得到加拿大FDA的批准，间充质干细胞的临床应用达到一个历史性高度。间充质干细胞目前已顶替胎盘干细胞而成为生物医学研究中首选的种子细胞，并被广泛应用于各种疾病的基础及临床研究。10至20年后，干细胞将会成为一种基本的医疗技术，帮助人们解决现在无法克服的疾病。

目前干细胞治疗疾病的途径大多采用静脉输注，这种产品属于药品中的注射剂。作为药物开发干细胞制剂是干细胞产品最终能够真正受用于人类的最好的方式。因此，很多大型生物公司已着手将干细胞开发为干细胞制剂，对于药品来说需要考虑产品的稳定性及有效性，因为干细胞属于生物活性物质，对于开发药物来说，如何将干细胞进行稳定的储存是转化的关键的工艺。

实验室中干细胞的冻存手段大多采用二甲基亚砜、牛血清、培养液等按照一定比例混合后进行细胞的冻存，但是牛血清为动物来源物质，不可应用于临床产品中。也有公司采用其他产品进行开发，如授权号为CN103070161B的专利《一种脂肪间充质干细胞冻存液及冻存方法》中采用药物，人自体血清，DMEM-LG培养基等成分组成，人自体血清存在较大的差异，可在临床产品中使用，但作为产品存在质量的不一致性，这在后期的应用会对人体造成很大的风险。

目前也有一些冻存液的开发致力于临床应用，如授权号为CN101990888B的发明专利《干细胞冻存液及干细胞的冻存方法》中提供了一种干细胞冻存液及其冻存方法，授权号为CN201010246409.3的专利 《一种直接静脉应用的间充质干细胞冻存液》，但是这种冻存液中的主要成分是人AB血清或者血浆，这种人源非产品成分的使用存在获取有限，且不是临床可用的产品，如在干细胞制剂及临床中使用，存在来源不可控，质量标准不明确，产品稳定性不可控的风险。

授权号为CN201110419684.5的发明专利《一种间充质干细胞冻存液及其制备方法》中制备的干细胞冻存液取得了较好的细胞冻存效果，细胞活力可达到90%以上，但是细胞冻存液中没有提及细胞的分散程度，细胞的分散程度可影响产品临床应用的安全性。

从以上的分析中可以看出，虽然现在已有相关的细胞冻存液，但是这些冻存液在应用于干细胞临床的过程中，还存在一定的问题。

发明内容

针对现有技术中干细胞冻存液在临床应用中存在的上述缺陷和不足，本发明提供了一种可用于临床的干细胞冻存液及干细胞冻存和复苏方法，通过本发明的技术方案，可以为临床提供质量稳定，标准明确的干细胞冻存液。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

本发明第一方面，提供一种干细胞冻存液，包含以下组分：人血白蛋白注射液、低分子肝素钙、复方氨基酸注射液、复方电解质注射液、右旋糖苷-葡萄糖注射液和抗氧化剂。

优选地，所述人血白蛋白注射液的体积份数为10-30。更优选地，所述人血白蛋白注射液的体积份数为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。