[发明专利]一种基于胶体金光热效应的免疫层析毛细管及其应用

权利要求书

1.一种沙门氏菌的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：

将待测样品液与金标抗体混合，注入免疫层析毛细管的检测区，孵育处理；

排出回收金标抗体，观察检测区显色情况，用于定性检测；

检测照射前后温度并记算温差，用于定量检测；

所述免疫层析毛细管的制备方法如下：

玻璃毛细管的修饰：

玻璃毛细管经预处理除去表面的灰尘及杂质，同时活化毛细管壁上的羟基，然后使用氨基硅烷溶液进行修饰；

将经过预处理的玻璃毛细管浸入甲醇作为有机溶剂的3-氨丙基三乙氧基硅烷的修饰液中，通过共价结合使烷基偶联剂固定在玻璃毛细管内壁上，烷基偶联剂末端含有氨基，连接抗体；

免疫层析毛细管的组装：

将修饰后的玻璃毛细管一端作为检测区，注入一抗，将玻璃毛细管直立于酶标板孔中10min，将剩余液体排出，检测区浸入PBST缓冲液中，抽动清洗3 min重复清洗3次；

在玻璃毛细管另一端注入二抗作为质控区；将检测区和质控区都固定好的玻璃毛细管浸于脱脂牛奶中，以封闭非特异性位点，然后浸于PBST缓冲液中，抽动清洗；

一抗注入浓度控制为0.2~0.4 mg·mL^-1；

二抗注入浓度控制为0.1~0.3 mg·mL^-1;

进行定量检测时，使用532 nm绿色激光照射毛细管检测线区域10~100 s;

进行定量检测时，毛细管放置的基底材料选自纸质、玻璃、吸水垫、塑料。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，照射毛细管检测线区域50 s。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，基底材料为吸水垫。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述预处理为：将玻璃毛细管经强酸、强碱清洗，并高温干燥，高温干燥具体条件为：温度控制为200~300℃，时间控制为0.5~1 h。

5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述甲醇浓度控制为10%~20%。

6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述甲醇浓度控制为15%。

7.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，一抗注入浓度控制为0.3 mg·mL^-1。

8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，二抗注入浓度控制为0.2 mg·mL^-1。

9.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，将检测区和质控区都固定好的玻璃毛细管在37℃下浸于4~6%的脱脂牛奶中1.5~3 h。

10.如权利要求9所述的检测方法，其特征在于，将检测区和质控区都固定好的玻璃毛细管在37℃下浸于5%的脱脂牛奶中2 h。