[发明专利]一种荧光探针及其制备方法、生物传感器及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的荧光探针，其特征在于，包括金纳米簇粒子，其中掺杂有铕元素，所述荧光探针的粒径为1-2nm。

2.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)分别配制氯金酸溶液和硝酸铕溶液，混合均匀，得到含铕元素的反应体系；

(2)在所述步骤(1)得到的反应体系内加入球蛋白，合成金纳米簇溶液，调节所述金纳米簇溶液的pH为碱性，在搅拌条件下剧烈反应，得到铕掺杂金纳米簇的荧光探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，氯金酸溶液和硝酸铕溶液的体积比为1︰1，质量浓度比为1︰1-2；所述氯金酸溶液的浓度为5-10mM，所述硝酸铕溶液的浓度为5-10mM。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，球蛋白为牛血清白蛋白，其浓度为50-100mg/mL，球蛋白加入过程中以1000r/min的速度剧烈搅拌并持续搅拌2-5min；调节所述金纳米簇溶液的pH为10-12，调节pH所用的试剂为氢氧化钠溶液，其浓度为1-2M。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，反应的温度为35-37℃，反应的时间为10-12h，搅拌转速为1000-1200r/min。

6.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的生物传感器，其特征在于，包括权利要求1所述或由权利要求2-5中任一项所述制备方法制备得到的荧光探针以及标准2,6-吡啶二羧酸浓度的标准曲线，所述标准曲线由所述荧光探针与不同浓度的标准2,6-吡啶二羧酸进行混合反应后通过荧光法测定、绘制得到。

7.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的生物传感器的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

A)将权利要求1所述或由权利要求2-5中任一项所述制备方法制备得到的荧光探针，与不同浓度的标准2,6-吡啶二羧酸混合进行特异性反应，构建检测2,6吡啶二羧酸的比率型荧光传感器；

B)采用荧光法进行测定，得到不同浓度的标准2,6-吡啶二羧酸荧光光谱图；

C)以各荧光光谱图中617nm与650nm处荧光强度的比值为纵坐标，标准2,6-吡啶二羧酸浓度为横坐标，绘制标准曲线。

8.根据权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述2,6-吡啶二羧酸的浓度分别为1μM，μM，10μM，15μM，20μM，25μM，30μM，35μM，40μM，45μM，50μM；所述荧光探针与标准2,6-吡啶二羧酸的体积比为1︰120-240。

9.根据权利要求7或8所述的构建方法，其特征在于，所述特异性反应的温度为25-30℃，时间为10-30min。

10.一种如权利要求6所述或由权利要求7-9中任一项所述构建方法得到的生物传感器的应用，其特征在于，采用所述的生物传感器检测2,6-吡啶二羧酸的浓度，检测的过程包括如下步骤：取待测2,6-吡啶二羧酸与所述荧光探针按体积比为1︰120-240进行混合反应，然后采用荧光法进行测定，得到相应荧光强度值，在所述的标准曲线中找到该荧光强度值所对应的2,6-吡啶二羧酸的浓度，即得待测2,6-吡啶二羧酸的浓度。