[发明专利]单分子收集方法及系统

权利要求书

1.一种单分子收集方法，包括：

将待分离的单分子样品与反应试剂混合在一起，通过液滴制备技术，将单分子与反应试剂包裹到一个液滴中；

通过信号放大系统将液滴中的单分子信号进行放大；

对液滴中的信号进行检测；

通过液滴收集系统，将包含特定信号的目标液滴收集出来，实现单分子的收集。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的单分子是核酸或者可以被核酸标记的物质。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述可以被核酸标记的物质为小分子、小肽、核酸、蛋白质、酶分子或者细胞。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应试剂是能够对待测目标分子进行信号放大的各种成分的试剂，包括聚合酶链式反应体系。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，通过信号放大系统将液滴中的单分子信号进行放大，包括：

通过聚合酶链式反应、酶促反应方法或链置换反应。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，对液滴中的信号进行检测包括：

采集每个液滴特定目标分子的发射波长信息，或者采集每个液滴的前向散射或侧向散射信息。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将包含特定信号的液滴收集出来，包括：

通过外加电场或磁场使目标液滴偏转，将目标液滴牵引至特定的收集容器中。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，液滴加电的方法包括：

将油包水的液滴进行双层包裹，使其形成水包油包水的双包液滴，以便使液滴能够带电，从而使目标液滴在电场中实现偏转。

9.一种单分子收集系统，其特征在于包括：

反应试剂储存装置，用于储存单分子的混合样品和反应试剂；

动力装置，用于推动反应试剂与单分子以及油相相互混合；

液滴发生装置，经推动的反应试剂、单分子和油相在其中生成油相包裹单分子的单层包裹液滴；

液滴PCR反应模组，用于对液滴内的单分子信号进行放大；

液滴双层包裹装置，进一步通过鞘液包裹液滴，形成双层包裹液滴；

信号检测器，用于对液滴中的信号进行检测；液滴收集装置，用于将包含特定信号的目标液滴收集出来，实现单分子的收集。

10.根据权利要求9所述的单分子收集系统，其特征在于，所述信号检测器和液滴收集装置为集成的流式分选系统。

11.应用权利要求9或10所述的单分子收集系统，进行单分子DNA的收集，核酸适配体的筛选，分子间的相互作用研究，突变的检测，酶进化、合成生物学设计或靶向片段测序。