[发明专利]基于氧化石墨烯的核酸提取方法在审
申请号: | 201910607845.X | 申请日: | 2019-07-08 |
公开(公告)号: | CN112195175A | 公开(公告)日: | 2021-01-08 |
发明(设计)人: | 李智洋;翁国武;王炜;朱沉雷;宋莲;黄远福 | 申请(专利权)人: | 浙江智扬生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 312000 浙江省绍兴市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 氧化 石墨 核酸 提取 方法 | ||
1.一种含氧化石墨烯的核酸提取试剂,其特征如下:该试剂主要成分有氧化石墨烯,表面活性剂,剩余溶剂为无核酸酶水。
2. 如权利要求1 所述的核酸提取试剂中氧化石墨烯的优选的浓度为0.01-0.1%。
3. 如权利要求1 所述的核酸提取试剂中表面活性剂可以是但不限于DTAB、DDAB、Triton X-100、EDDAB等或其中2-3 种的组合。
4. 如权利要求3 所述表面活性剂浓度为0.5-5.0%。
5. 如权利要求4 所述表面活性剂为DTAB和DDAB,浓度各为0.5%和1.0%。
6.一种含氧化石墨烯的核酸提取试剂的使用方法包括以下步骤:细胞裂解、核酸吸附、样品洗涤、核酸洗脱。
7. 如权利要求6 所述的细胞裂解步骤为:核酸提取试剂与全血、血清、血浆、唾液、尿液、脑脊液、细胞和组织培养液等生物样品等体积均匀混合,室温放置10min ;泌尿生殖道或口腔拭子样品需先用生理盐水振荡清洗,然后吸取漂洗液加入核酸提取试剂提取核酸。
8. 如权利要求6 所述的核酸吸附步骤为:将离子柱或磁珠等磁性材料,放入裂解液中振荡10min。
9. 如权利要求6 所述的样品洗涤步骤为:分别采用洗涤液1和洗涤液2洗涤固相材料各一次。
10.如权利要求6 所述的核酸洗脱步骤为:在离子柱上或磁珠等磁性颗粒中加入50-100μl TE(pH8.0),振荡洗脱10min,获得提取纯化后的核酸。
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