[发明专利]一种冻干脱细胞肌腱线及其构建方法

权利要求书

1.一种冻干脱细胞肌腱线的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)清除新鲜动物肌腱表面的外膜和滑膜组织；

b)将肌腱置于-56℃真空冻干24h；

c)通过物理开松、梳理的方法获得冻干肌腱纤维束；

d)冻干肌腱纤维束通过梳理成条；

e)成条的肌腱纤维束用双蒸水湿化；

f)通过加捻，将已湿化的成条的肌腱纤维束制备成长线，保存于双蒸水中；

g)湿化的肌腱纤维线进行脱细胞处理：将步骤f得到的肌腱纤维线放入Tris溶液，加入质量浓度0.05％丝氨酸蛋白酶抑制剂，常温下摇床震荡12h；倒掉溶液，PBS溶液冲洗3遍，加入质量浓度0.05％胰蛋白酶，37℃摇床震荡2h；倒掉溶液，PBS冲洗3遍后，加入90U/mL核酸酶，37℃摇床震荡2h；倒掉溶液，PBS冲洗3遍后，使用超声波破碎仪，超声探头悬浮在样品上方0.5cm处，超声振幅240μm，频率20赫兹，接受5分钟的超声波处理；

h)将脱细胞的肌腱纤维线置于-56℃真空冻干3h。

2.根据权利要求1所述的冻干脱细胞肌腱线的构建方法，其特征在于，步骤a所述的动物为猪、牛。

3.根据权利要求1所述的冻干脱细胞肌腱线的构建方法，其特征在于，步骤c所述的物理开松方法是指挤压、锤击、或真空反爆气流冲击。

4.根据权利要求1所述的冻干脱细胞肌腱线的构建方法，其特征在于，所述的步骤d是将1000mg/米、500mg/米和250mg/米冻干肌腱纤维束成条。

5.根据权利要求1所述的冻干脱细胞肌腱线的构建方法，其特征在于，步骤g所有步骤均在摇床进行，均加5ml/L青霉素/链霉素溶液预防污染，完成每一步骤均使用PBS冲洗3遍。

6.一种冻干脱细胞肌腱线，其采用如权利要求1-5任一所述的构建方法制备得到。

7.一种如权利要求6所述的冻干脱细胞肌腱线在制备医用再生生物纤维材料中的应用。