[发明专利]一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸

权利要求书

1.编码非洲猪瘟病毒p54蛋白胞外区的基因，其特征在于：所述基因命名为E183L-1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述基因的PCR扩增用引物对，其特征在于，所述引物对序列为：

正向引物：5’-GGATCCATGGACTCCGAATTCCA-3’

反向引物：5’-CTCGAGTTAGGTAGAGAAGAAGGAG-3’。

3.利用权利要求1所述基因制备p54蛋白胞外区的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）载体构建：用PCR技术扩增所述E183L-1基因，并将该基因转入昆虫-杆状病毒Bac-to-Bac表达系统的载体；得到重组载体后，将其转入感受态细胞中，培养后提取杆状病毒质粒；

所述昆虫-杆状病毒Bac-to-Bac表达系统的载体为pFastBacI 、pFastBacDual、pFastBacHTA、pFastBacHTB中任一种；

所述感受态细胞为E.coli DH5α和/或E.coli DH10Bac；

2）蛋白表达与纯化：用所述提取的杆状病毒质粒转染昆虫细胞，实现E183L-1基因的真核表达，提取并纯化表达产物，即得。

4.如权利要求3所述制备p54蛋白胞外区的方法，其特征在于：所述昆虫细胞为sf9 、sf21 、High Five中任一种。

5.权利要求3所述方法制备的p54蛋白胞外区蛋白。

6.一种利用权利要求5所述p54蛋白胞外区蛋白制备的检测非洲猪瘟病毒抗体的试纸，其特征在于，具体结构包括：底板，底板中部设层析膜，以及分设底板两端的样品垫和吸水垫；所述样品垫与层析膜之间设有结合垫；所述样品垫与结合垫、结合垫与层析膜、层析膜与吸水垫两两之间紧密连接；

所述层析膜上设有检测线和质控线；

所述结合垫上喷涂有与标记物结合的所述p54蛋白胞外区蛋白；

所述检测线靠近样品垫设置，检测线由金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）溶液喷涂形成；所述质控线靠近吸水垫设置，质控线由抗非洲猪瘟病毒的IgG溶液喷涂形成；

所述标记物为胶体金、胶体银或胶体硒中任一种；所述样品垫与结合垫为玻璃纤维膜、尼龙纤维膜或聚酯纤维膜任一种；所述层析膜为硝酸纤维素膜、纯纤维素膜、羧化纤维素膜或聚偏二氟乙烯纤维膜中任一种；所述吸水垫为吸水滤纸。