[发明专利]一种诱导间充质干细胞分化成为多巴胺能神经元的培养基以及方法在审
| 申请号： | 201910610416.8 | 申请日： | 2019-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN110257332A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 王小燕;陈东炀;李学家;岳坤 | 申请（专利权）人： | 广东省赛莱拉干细胞研究院;广州赛莱拉生物基因工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0793 | 分类号： | C12N5/0793 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 刘猛 |
| 地址： | 510000 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多巴胺能神经元 诱导培养基 间充质干细胞 培养基 基础培养基 抗坏血酸 诱导分化 诱导 分化 干细胞技术 阶段培养基 优化组合 分化率 成功 | ||
1.一种诱导间充质干细胞分化成为多巴胺能神经元的培养基，其特征在于，包括预先诱导培养基和多巴胺能神经元诱导培养基；所述预先诱导培养基以DMEM/F12为基础培养基，含有FBS、bFGF、cAMP和L-抗坏血酸；所述多巴胺能神经元诱导培养基以DMEM/F12和Neurobasal为基础培养基，含有FBS、FGF-8、SHH、cAMP、L-抗坏血酸、GDNF和BDNF。
2.根据权利要求1所述培养基，其特征在于，所述预先诱导培养基以DMEM/F12为基础培养基，含有体积百分比5％-10％FBS、10-100ng/ml bFGF、0.1-0.5mM cAMP和0.1-0.2mM L-抗坏血酸。
3.根据权利要求2所述培养基，其特征在于，所述预先诱导培养基以DMEM/F12为基础培养基，含有体积百分比10％FBS、50ng/ml bFGF、0.25mM cAMP和0.2mM L-抗坏血酸。
4.根据权利要求1所述培养基，其特征在于，所述多巴胺能神经元诱导培养基以体积比为1:1的DMEM/F12和Neurobasal为基础培养基，含有体积百分比0.5％-1％FBS、10-100ng/ml FGF-8、10-100ng/ml SHH、0.1-0.5mM cAMP、0.1-0.2mM L-抗坏血酸、10-20ng/ml GDNF和10-20ng/ml BDNF。
5.根据权利要求4所述培养基，其特征在于，所述多巴胺能神经元诱导培养基以体积比为1:1的DMEM/F12和Neurobasal为基础培养基，含有1％FBS、50ng/ml FGF-8、50ng/ml SHH、0.25mM cAMP、0.2mM L-抗坏血酸、10ng/ml GDNF和10ng/ml BDNF。
6.权利要求1-5任意一项所述培养基在诱导间充质干细胞分化成为多巴胺能神经元中的应用和/或在制备诱导间充质干细胞分化成为多巴胺能神经元的试剂中的应用。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。
8.一种诱导诱导间充质干细胞分化成为多巴胺能神经元的方法，其特征在于，将间充质干细胞加入权利要求1所述培养基中的预先诱导培养基预诱导2天后，第3天更换权利要求1所述培养基中的多巴胺能神经元诱导培养基继续培养7天，隔天换液。
9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述间充质干细胞为P1代脐带间充质干细胞。
10.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述预诱导和多巴胺能神经元诱导培养基继续培养的环境条件为37℃、5％CO2、饱和湿度。
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