[发明专利]杀鱼假交替单胞菌及其用途

说明书

本发明提供了一种杀鱼假交替单胞菌及其用途，具体地，本发明公开了一株来自藤壶附生菌的杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)X‑21，其具有较高的蛋白酶生产能力，在初步优化的发酵条件下发酵液蛋白酶酶活力能够达到441.18U/mL；并且X‑21菌株产蛋白酶能够有效耐受Fe²⁺、Ca²、Mg²⁺这些二价离子，极大地降低了酶对作用对象的要求，并且最适pH达到了10，非常适合应用于洗涤工业中。同时本发明蛋白酶的耐碱特性，也是适用于明胶制备和深加工工业中。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及一种3.杀鱼假交替单胞菌及其用途。

背景技术

蛋白酶是水解蛋白质的酶类，被广泛应用于生态环境治理等领域。蛋白酶包括植物、动物和微生物蛋白酶，而其中，由于微生物生长的高效率，微生物蛋白酶易大规模发酵生产，因此微生物蛋白酶越来越成为主要制备来源。

蛋白酶占酶制剂市场份额的65％以上，其中微生物产蛋白酶占据世界工业酶总量的约40％。蛋白酶主要用于加酶洗涤剂，另外还可以应用于食品、医疗、制革、丝绸等行业。由于蛋白酶的广泛用途以及产酶效率不高等原因,我国的蛋白酶主要依赖进口。

我国是一个海洋大国，海洋面积广阔，资源丰富。海洋微生物是海洋中生物资源的重要组成部分，种类可达2～10亿种，但人们所开发利用的还不足其中的1％。我国海洋微生物资源的探索、研究和利用正逐步追赶发达国家。因此，探索并利用海洋来源的产蛋白酶微生物具有极高的研究、应用以及商业价值。

本领域技术人员致力于开发新型的蛋白酶生产菌株及蛋白酶，一方面希望提高蛋白酶的生产效率，另一方面期望获得具有不同特性的蛋白酶以满足不同应用领域的需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种产蛋白酶的杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonaspiscicida)及其应用。

在本发明的第一方面，提供了一种产蛋白酶的微生物菌株，所述微生物菌株为：

菌株1：杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)X-21，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.17513；或

菌株2：所述菌株2为菌株1的衍生菌株，比如，菌株1经基因突变或基因工程改造获得的菌株。

本发明的第二方面，提供了一种蛋白酶，所述蛋白酶由杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)发酵制得。

在另一优选例中，所述蛋白酶由本发明第一方面所述的微生物菌株发酵制得。

本发明的第三方面，提供了一种制备蛋白酶的方法，所述方法包括步骤：

(1)发酵本发明第一方面所述的微生物菌株；

(2)从发酵液中分离获得蛋白酶。

在另一优选例中，所述步骤(1)中，发酵使用的碳源为可溶性淀粉、蔗糖、或麦芽糖。

在另一优选例中，所述步骤(1)中，发酵温度15-30℃，优选为约25℃。

在另一优选例中，所述步骤(1)中，发酵起始pH为7.0-8.0；优选为约7.5。

在另一优选例中，所述步骤(1)中，发酵盐度为5‰-20‰(w/w)；优选为约15‰(w/w)。

本发明的第四方面，提供了一种生物酶制剂，所述生物酶制剂包括本发明第二方面所述的蛋白酶。

在另一优选例中，所述生物酶制剂还包括选自下组的一种或多种生物酶：