[发明专利]检测重组人肽基脯氨酰顺反异构酶-H表达水平的试剂的应用和试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及检测重组人肽基脯氨酰顺反异构酶‑H表达水平的试剂的应用和试剂盒。更具体地，涉及检测PPIH表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。临床样本检测结果显示，乳腺癌中PPIH表达较癌旁组织显著升高；且PPIH高表达不利于乳腺癌患者总体生存。因此，检测该基因表达变化的试剂可用于乳腺癌预后或者诊断、治疗。

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，涉及检测重组人肽基脯氨酰顺反异构酶-H(PPIH)表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。

背景技术

乳腺癌是最为常见的妇科恶性肿瘤。全球肿瘤流行病统计数据显示，2012年世界范围内乳腺癌新发病例总数1677000例，是仅次于肺癌的第二高发肿瘤，也是女性发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。我国乳腺癌发病率高达25.89/10万，约占所有女性恶性肿瘤发病率的16.83％。而且，我国乳腺癌患病数和新诊断患者数在全世界的比例正在逐年增加，且呈现出发病年轻化趋势，严重影响女性的身心健康、甚至危及生命。因此，乳腺癌发病机制和预后的研究对乳腺癌患者意义深远。乳腺癌在细胞起源、组织学形态、疾病分级、临床表现、治疗反应以及转移潜能等方面都表现出极大的复杂性与异质性，限制了乳腺癌预后标志物应用的广泛性。因此，迫切需要开发更有针对性的乳腺癌预后标志物，以满足临床需求。

随着多组学高通量数据的快速增加，一些分子生物学标志物被发现与乳腺癌发生和预后有关，这使得更准确、有效地诊疗乳腺癌成为可能。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的乳腺癌预后标志物重组人肽基脯氨酰顺反异构酶-H(PPIH)，由此进一步提供检测PPIH表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。

PPIH，又名CYPH，是一种蛋白编码基因，定位于1p34.2，包含16个外显子，Gene ID:10465，其编码蛋白质主要定位于细胞核和细胞质。目前，有关PPIH基因在乳腺癌发生发展中的作用未见报道。本发明的发明人通过癌症和肿瘤基因图谱(Cancer Genome Atlas，TCGA)高通量数据挖掘发现PPIH高表达不利于乳腺癌患者预后，并通过收集临床乳腺癌患者样本和随访信息，进一步验证PPIH表达差异对乳腺癌患者的预后作用。

为了实现上述目的，本发明的第一方面提供检测重组人肽基脯氨酰顺反异构酶-H(PPIH)表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用。

进一步地，所述检测PPIH表达水平包括检测PPIH的基因表达水平和/或检测PPIH的蛋白表达水平。

更具体地，所述检测PPIH表达水平的方法包括：通过RT-qPCR方法检测乳腺癌和癌旁组织中PPIH的表达量；通过分子探针技术检测乳腺癌和癌旁组织中PPIH mRNA表达量；通过免疫组化或Western-Blot检测乳腺癌和癌旁组织中PPIH蛋白表达量。

更具体地，所述检测PPIH表达水平的试剂为靶向PPIH编码DNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向PPIH的抗体。

根据本发明，优选地，所述检测PPIH表达水平的试剂为具有SEQ ID NO：1和SEQ IDNO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。

5’-TGCTCTAAGTGCGATTGGCT-3’，SEQ ID NO：1；

5’-CTACATCTCCCCACACTGCG-3’，SEQ ID NO：2。