[发明专利]一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法及装置

权利要求书

1.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：包括步骤如下：

1）：首先将含有待测颗粒的临床样品与检测试剂接触温育；所述检测试剂含有至少一个用于标记样本中待测颗粒的探针；然后再与结合有探针的对照颗粒混合形成混合物；

2）：将步骤1）中的混合物加载到设有观察窗口的反应容器中，观察和/或拍摄照片记录；

3）：根据步骤2）中观察和拍摄记录的结果，确定样品中待测颗粒的特性和浓度。

2.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：包括步骤如下：

a）：将含有待测颗粒的临床样品与检测试剂接触温育；所述检测试剂含有用于标记样本中待测颗粒的第一探针，所述第一探针能与待测颗粒上指示其来源的第一标记物相结合；然后再与对照颗粒混合获得第一混合物，所述对照颗粒含有被第二标记物包裹的第二探针；所述第二标记物类似于第一标记物；

b）：将步骤a）中获得的第一混合物与涂有第一结合配偶体的磁性颗粒接触进一步培育，获得第二混合物；所述第一结合配偶体可特异性地与待测颗粒上的第一标记物和对照颗粒上的第二标记物相结合；

c）：将步骤b）中获得第二混合物加载到设有观察窗口的反应容器中，并通过能够产生磁场的设备将磁性颗粒以及被磁性颗粒所捕获的待测颗粒和对照颗粒一起吸引且固定到反应容器观察窗口的内表面，以便观察和/或拍摄照片记录；

d）：根据步骤c）中观察和拍摄的记录结果，确定样品中待测颗粒的特性和浓度。

3.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：包括步骤如下：

S1：将含有待测颗粒的临床样品与检测试剂接触温育；所述检测试剂含有用于标记样本中待测颗粒的第一探针和第三探针，所述第一探针能与待测颗粒上指示其来源的第一标记物相结合；然后与对照颗粒混合形成混合物，所述对照颗粒结合有第二探针，所述第二探针被对照颗粒的第二标记物包裹；所述第二标记物类似于第一标记物；

S2：将步骤S1中的混合物加载到设有观察窗口的反应容器中，并观察和/或拍摄照片记录；

S3：根据步骤S2中观察和拍摄记录的结果，确定样品中待测颗粒的特性和浓度。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述的临床样品预先经过完整的人体细胞去除处理，所述的待测颗粒包括活细胞分泌的细胞外囊泡、死细胞的细胞碎片或聚集体。

5.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：还包括稀释步骤，该稀释步骤为临床样品与检测试剂接触培育后稀释，然后与对照颗粒混合。

6.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述探针均为荧光探针或者能够化学发光的酶，且第一、第二和第三探针具有可区分的发光波长。

7.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述对照颗粒为非磁性粒子，其直径尺寸包括50～100nm，50～250nm，50～500nm，50～1000nm和500～2000nm。

8.根据权利要求2所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述的磁性颗粒上的第一结合配偶体包括抗体、核酸、肽、适体、拟肽、配体、受体或其组合。

9.根据权利要求2或8所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述磁性颗粒的直径尺寸包括0.5～3.5μm，0.5～2μm和0.5～1.5μm。

10.根据权利要求2或3所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述第一探针包括对核酸或脂质膜具有结合亲和力的探针，用于指示待测颗粒是否源自死细胞或正在死亡的细胞。

11.根据权利要求3所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述第三探针用于确定待测颗粒的特性，即确定待测颗粒是否带有特定的标记物。