[发明专利]一种单胺氧化酶A的特异性双光子荧光探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种单胺氧化酶A的特异性双光子荧光探针，其特征在于，具有如通式(I)所示的化合物F1。

2.基于权利要求1所述的单胺氧化酶A的特异性双光子荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，6-溴-N，N-二甲基萘-2-胺

将微波管中的2mL，30.16mmol二甲胺溶液，1.0g，4,48mmol 6-溴-2-萘酚，1.78g，9.37mmol Na₂S₂O₅和15mL H₂O的混合物在160℃下搅拌7小时，产物用氯化钠溶液洗涤，水相用乙酸乙酯萃取，然后通过快速柱色谱法纯化，旋干后得到白色固体状的6-溴-N，N-二甲基萘-2-胺，即化合物1；

步骤2，N，N-二甲基-6-(吡啶-4-基)萘-2-胺

将0.20g，0.80mmol化合物1，0.16g，1.28mmol 4-吡啶基硼酸，0.093g，0.034mmol四三苯基膦钯(0)的混合物溶于10mL N，N-二甲基乙酰胺中；向该混合物中加入含0.55g，1.69mmol Cs₂CO₃的1.0mL水溶液，将混合物抽空并充入氮气，然后在120℃和氮气保护下搅拌18小时，冷却至室温后，将混合物倒入50mL水中，过滤得到浅棕色固体，然后通过快速柱色谱法纯化，得到化合物2N，N-二甲基-6-(吡啶-4-基)萘-2-胺；

步骤3，4-(6-(二甲基氨基)萘-2-基)-1-甲基吡啶-1-鎓

将47μL，0.75mmol 1-甲基碘加入到含0.15g，0.60mmol化合物2的10mL MeCN溶液中，将反应混合物在室温下保持24小时，过滤得橙红色固体，然后通过快速柱色谱法纯化，得到橘色粉末状4-(6-(二甲基氨基)萘-2-基)-1-甲基吡啶-1-鎓，即化合物FD1；

步骤4，N，N-二甲基-6-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)萘-2-胺

0℃下，在含0.1g，0.38mmol化合物FD1的10mL MeOH溶液加入0.043g，0.08mmol NaBH₄，并将反应混合物搅拌10分钟，在减压下除去有机溶剂后，将30mL水加入到含水残余物中，用30ml*3的乙酸乙酯萃取，并经无水NaSO₄干燥，蒸发溶剂后，通过快速柱色谱法纯化残余物，得到浅棕色N，N-二甲基-6-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)萘-2-胺，即化合物F1。

3.基于权利要求1所述的特异性双光子荧光探针的生物应用，其特征在于，所述荧光探针应用于体外检测细胞内单胺氧化酶A上。

4.根据权利要求3所述的生物应用，其特征在于，将该探针作为体外检测单胺氧化酶A的特异性底物，发生氧化反应，通过定量检测单位时间内氧化产物的荧光信号来测定不同生物体系中单胺氧化酶A的活性。