[发明专利]可用于区分疫苗免疫和自然感染的小反刍兽疫检测试剂盒

说明书

本发明涉及小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒。本发明的检测试剂盒包括固相载体以及独立地连接于所述固相载体上的特定多肽组合。所述试剂盒被采用以用于区分受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物和受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物，或者用于从受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物群体中区分出受到小反刍兽疫疫苗免疫后又受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物。

技术领域

本发明主要涉及兽用检测试剂盒。具体而言，该试剂盒可用于区分对象生物中的小反刍兽疫疫苗免疫和小反刍兽疫自然感染。

背景技术

小反刍兽疫(peste des petits ruminants，PPR)俗称羊瘟，又名小反刍兽假性牛瘟(pseudorinderpest)、肺肠炎(pneumoenteritis)、口炎肺肠炎复合症(stomatitis-pneumoenteritis complex)，是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病，主要感染小反刍动物，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。

1942年本病首次在象牙海岸发生，其后，非洲的塞内加尔、加纳、多哥、贝宁等有本病报道，尼日利亚的绵羊和山羊中也发生了本病，并造成了重大损失。亚洲的一些国家也报道了本病，根据世界动物卫生组织(OIE)1993年《世界动物卫生》报道，孟加拉国的山羊有本病发生，印度德拉邦和马哈拉施特拉邦的部分地区绵羊中发生了类似牛瘟的疾病，最后确诊为小反刍兽疫，此后，泰米尔拉德邦也有受到感染报道。1993年，以色列第一次报道有小反刍兽疫发生，传染来源不明，为防止本病传播，以色列对其北部地区的绵羊和山羊接种了牛瘟疫苗。1992年，约旦的绵羊和山羊中发现了本病特异性抗体，1993年，有11个农场出现临诊病例，100多只绵羊和山羊死亡。1993年，沙特阿拉伯首次发现133个病例。2007年7月，该疫病首次传入我国西藏地区。

小反刍兽疫病毒属副黏病毒科麻疹病毒属。与牛瘟病毒有相似的物理化学及免疫学特性。病毒呈多形性，通常为粗糙的球形。病毒颗粒较牛瘟病毒大，核衣壳为螺旋中空杆状并有特征性的亚单位，有囊膜。病毒可在胎绵羊肾、胎羊及新生羊的睾丸细胞、Vero细胞上增殖，并产生细胞病变(CPE)，形成合胞体。

小反刍兽疫主要感染山羊、绵羊、美国白尾鹿等小反刍动物，发病动物死亡率高，为我国划定的一类动物疫病。

目前，尚无有效方法治疗小反刍兽疫，只能采取疫苗接种、疫情发生后扑杀及定期血清监测的方法来进行控制。因此，该病的血清学诊断及疫苗免疫效果的评估与监测显得尤为重要。

世界动物卫生组织推荐采用的小反刍兽疫病毒抗体检测方法主要有病毒中和试验(VNT)和酶联免疫测定(ELISA)。其中，病毒中和试验方法的检测结果准确，是检测小反刍兽疫病毒的金标准，但该方法检测时间长且不适于检测大量样本。与此相对，酶联免疫测定的特异性和敏感性较高、检测时间比病毒中和试验短且适合检测大量样品，因此，被广泛应用于小反刍兽疫病毒抗体的检测。

但是，疫苗免疫并非百分之百成功，会出现免疫失败、动物接受免疫后又发生自然感染现象。这些免疫后又被感染的动物可能成为动物群体中的传染源，增加动物群体性发病的风险。因此，尽快识别出这些免疫后又被感染的动物并将其扑杀是十分重要的。

另一方面，小反刍兽疫疫苗为减毒活疫苗，现有的小反刍兽疫病毒抗体检测方法无论是病毒中和试验(VNT)还是酶联免疫测定(ELISA)，都不能区分疫苗免疫和自然感染。

发明内容

鉴于上述现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种能够用于区分小反刍兽疫疫苗免疫和小反刍兽疫病毒自然感染的检测试剂盒。

发明人为解决上述技术问题进行了深入研究，结果发现通过将下述多肽组合1中的至少一条多肽(即一条、两条、三条、四条或全部多肽)是否对对象生物来源的生物样本有响应作为指标，能够区分对象生物是被小反刍兽疫疫苗免疫还是被小反刍兽疫病毒自然感染。从而，完成了本发明。

因此，本发明包括：