[发明专利]一种修复镉污染土壤并促进植物生长的复合微生物菌剂的制备方法及应用有效
| 申请号： | 201910627755.7 | 申请日： | 2019-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN110408562B | 公开（公告）日： | 2021-05-04 |
| 发明（设计）人： | 陈晨;赵启明;徐希辉;陈静;陈亚华;夏妍;沈振国 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C05F11/08;C05G3/80;A01N63/00;C09K17/14;A01P21/00;B09C1/10;C12R1/01;C12R1/07;C09K101/00 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 薛海霞;董建林 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 修复 污染 土壤 促进 植物 生长 复合 微生物 制备 方法 应用 | ||
1.一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，将复合微生物菌剂与草木灰混合后与土壤搅拌均匀；所述的复合微生物菌剂含有泛菌属（Pantoea sp.）菌株PGP6及芽孢杆菌属（Bacillus sp.）菌株PGP5，其中PGP5、PGP6均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期分别为2018年10月19日、2019年5月27日，菌种保藏号分别为CCTCC NO：M2018695、CCTCC NO：M2019398；所述植物为龙葵。
2.根据权利要求1所述一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，该复合微生物菌剂为液体制剂；菌种保藏号分别为CCTCC NO：M2018695、CCTCC NO：M2019398的两株菌株的总有效活菌数为9.154亿个每毫升以上。
3.根据权利要求1所述一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，该复合微生物菌剂为固体制剂，菌种保藏号分别为CCTCC NO：M2018695、CCTCC NO：M2019398的两株菌株的总有效活菌数为109个每克以上。
4.根据权利要求2所述的一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，通过传统的摇瓶液体发酵共同培养PGP5、PGP6以制备复合微生物菌剂。
5.根据权利要求4所述的一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，将两株目标菌株Bacillus sp.PGP5、Pantoea sp.PGP6分别按照百分之一的接菌量一同加入液体LB培养基中，活化18-20 h，按接种量1 % v/v接入pH=8的LB培养基并于25℃，250pm/min摇床培养24 h，8000 rpm离心，用无菌水清洗三次后将悬浮液OD值调至OD600 = 1，即得液体复合菌剂。
6.根据权利要求3所述的一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，通过传统的摇瓶液体发酵共同培养PGP5、PGP6以制得复合微生物液体菌剂；使用冷冻干燥技术，将所制得的复合微生物液体菌剂制备成固体菌粉，即得到固体菌剂。
7.根据权利要求6所述的一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法，其特征在于，所述的固体菌粉放入玛瑙研钵中磨碎，并均匀混入草木灰有机肥，获得菌肥，混合比例为固体菌粉：有机肥=1：1000 m：m；施用时，将菌肥按照与土壤比例1：50 v/v的配比进行施肥。
8.一种权利要求1所述修复镉污染土壤并促进植物生长的方法的应用，其特征在于，在原位污染土壤种植植物，将权利要求1所述的复合微生物菌剂与草木灰混合后与土壤搅拌均匀；利用复合微生物菌剂和草木灰强化植物修复镉污染土壤并促进植物生长；所述植物为镉积累植物龙葵；植物的制备和种植过程为：龙葵种子用0.5%的次氯酸钠消毒20-30min，均匀撒在灭菌蛭石上，待种子露白后浇Hoagland营养液，待长至四叶一心时，移苗至原位污染土壤中。
9.根据权利要求8所述的一种修复镉污染土壤并促进植物生长的方法的应用，其特征在于，所述的原位污染土壤为铅、锌、镉复合污染土壤。
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