[发明专利]用于检测尿路感染的引物组和包含该引物组的试剂盒在审
申请号: | 201910627996.1 | 申请日: | 2019-07-11 |
公开(公告)号: | CN110295241A | 公开(公告)日: | 2019-10-01 |
发明(设计)人: | 李腾;吴永辉;李达 | 申请(专利权)人: | 深圳易致生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/04;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19;C12R1/22;C12R1/01;C12R1/385;C12R1/37 |
代理公司: | 深圳市鼎泰正和知识产权代理事务所(普通合伙) 44555 | 代理人: | 代春兰 |
地址: | 518000 广东省深圳市福田区沙头*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 引物组 尿路感染 试剂盒 检测 病原菌 反应效率 检测样品 二聚体 碱基 扩增 引物 修饰 灵敏 细菌 | ||
本发明公开了一种用于检测尿路感染常见病原菌的引物组,包含5组SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.10的引物组。本发明还公开了一种用于检测尿路感染的试剂盒。本发明所述的引物组中部分碱基经过修饰,避免引物形成二聚体,提高了反应效率,增强了扩增的特异性。本发明所述的引物组用于尿路感染的试剂盒中,能够快速、灵敏、特异性地检测样品中尿路感染细菌。
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一组用于检测尿路感染的引物以及包含该引物组的试剂盒
背景技术
尿路感染又称泌尿系统感染,是尿路上皮对细菌侵入导致的炎症反应。尿路感染95%以上是由单一细菌引起的。其中50%左右的病人,其病原菌是大肠埃希杆菌。除大肠埃希菌外,肠球菌,绿脓假单胞菌,奇异变形杆菌,克雷伯杆菌等细菌常见于再感染、留置导尿管、有并发症之尿路感染者。临床研究数据表明超过95%的尿路感染是由大肠杆菌,肠球菌,肺炎克雷伯菌,铜绿假单胞菌和奇异变形杆菌引起。
目前临床上检测尿路感染细菌常用的方法有细菌培养法。细菌培养法是检测尿路感染细菌的金标准。但该方法对场地要求高,需要专业技术人员无菌操作。而且该方法检测成本高,耗时长。通常需要3-5天才能看到最终的检测结果。尿路感染微生物的临床诊断和鉴定,急需简单,快速,成本低的检测方法。等温扩增可以快速扩增核酸序列,而且不需要精密控温的仪器,在快速检测领域有很大的潜力。等温扩增不需要高温解链,其反应速度和特异性高度依赖于引物的设计与实验筛选。一般增加引物序列的长度可以加快反应速度,但同时增长的引物容易自身结合产生二聚体,降低了特异性与灵敏性,限制了等温扩增技术的应用。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明的发明目的在于提供一组用于检测尿路感染常见病原菌的引物,经过修饰的RPA引物用于特异性地快速检测尿路感染细菌的5种最常见的细菌。
本发明的另一目的在于提供一种用于检测尿路感染的试剂盒,该试剂盒包含经过修饰的RPA引物组,克服了尿路感染细菌当前临床检测的诸多问题,为尿路感染的诊断和精准治疗提供新的检测装置。
为了实现上述目的,本发明所采用的技术方案内容具体如下:
用于检测尿路感染的引物组,包含
引物组1:上游引物:ATTTCATAACCCCCTGTTTATTGTGTTA*A*T*G*G(SEQ ID NO.1)
下游引物:ATTTTGTTAAACTCAAACGTGATAATGA*G*A*A*T(SEQ ID NO.2)
引物组2:
上游引物:AACTCTCTACGTCGTATTTTATTGTCTTC*T*T*T*A(SEQ ID NO.3)
下游引物:AAGGGTTTTCTCTTCTTCAGCATATAATT*T*C*A*A(SEQ ID NO.4)
引物组3:
上游引物:ACACTTTTCTCAATAACACCGAGCAGGAG*G*T*T*C(SEQ ID NO.5)
下游引物:TAAAAAGGGGCGCTACTATAGCACAAAGAT*A*A*A*C(SEQ ID NO.6)
引物组4:
上游引物:TATTCCTAAATATAGTCAAGTTTCTTGTG*A*T*G*T(SEQ ID NO.7)
下游引物:ATTAAAACGAAAAATATTAAGAATATCGA*C*C*C*C(SEQ ID NO.8)
引物组5:上游引物:CCTGTTGTTCGTTGCGATCATGGGTG*T*T*T*C(SEQ ID NO.9)
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