[发明专利]一种自转录序列的检测方法与应用和鉴定方法及其应用在审
| 申请号： | 201910628165.6 | 申请日： | 2019-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN110358818A | 公开（公告）日： | 2019-10-22 |
| 发明（设计）人： | 侯春晖;何娜;牛龙见;姜大新 | 申请（专利权）人： | 南方科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谢岳鹏 |
| 地址： | 518055 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 转录 反转录引物 报告载体 检测 插入片段 反转录 应用 调控元件 检测结果 信息丢失 依次设置 转录序列 启动子 构建 漏检 位点 真核 自带 传递 | ||
【权利要求书】：
1.一种自转录序列的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
构建报告载体，所述报告载体包括依次设置的启动子、ORF序列和插入的DNA片段；
将所述报告载体转录为mRNA，并进行加尾；
使用反转录引物对所述mRNA进行反转录以获得cDNA；
所述反转录引物包括：5′-Z-Tm-Xn-3′；其中，Z为测序引物序列，X选自碱基A、T、C、G中的任一种，16≤m≤24，4≤n≤8，m、n为整数。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，还包括通过特异性引物对所述cDNA进行至少两轮扩增。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，16≤m≤20，5≤n≤7。
4.权利要求1-3任一项所述的检测方法在鉴定真核调控元件中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述真核调控元件为增强子、隔离子、沉默子中的任一种。
6.一种真核调控元件的鉴定方法，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述的自转录DNA的检测方法，所述DNA片段为真核调控元件的候选序列。
7.根据权利要求6所述的鉴定方法，其特征在于，所述真核调控元件为增强子、隔离子、沉默子中的任一种。
8.权利要求6-7任一项所述的鉴定方法在基因工程中的应用。
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